Stbl4感受态细胞|20×100ul|abs60052-爱必信(上海)生物科技有限公司

Stbl4感受态细胞

参考价：¥420

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一周

品牌：

爱必信

规格：

20×100ul

货号：

abs60052

CAS号：

产品详情

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产品描述：

产品名称：Stbl4感受态细胞

描述: Stbl4菌株来源于Stbl2菌株（Stbl2为JM109衍生菌株），用于克隆不稳定序列（如重复序列，逆转录病毒序列等）和甲基化的DNA序列，特别适合构建重组逆转录病毒或慢病毒质粒。可用于大质粒的构建和扩增，适用于构建和扩增质粒cDNA文库。区别于Stbl2菌株，Stbl4菌株在IPTG和X-gal存在的条件下，可进行α互补原理的蓝白斑筛选实验。感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19质粒检测转化效率大于10⁸ cfu/μg。
基因型：
mcrA Δ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1endA1gyrA96gal-thi-1supE44 λ- relA1 Δ(lac-proAB)/F′ proAB+ lacIqZΔM15 Tn10 (TetR)
菌株抗性：
对氨苄青霉素，卡那霉素，壮观霉素敏感，对四环素有抗性。

使用方法: 质粒转化步骤： 1、将感受态细胞置于冰水浴中化冻。待细胞刚化冻后，加入质粒 DNA 或 5-10μl 连接产物到细胞中，用手指拨打管底，轻轻混匀； 2、冰水浴中放置 15-30 分钟，不要晃动； 3、42℃热击 60 秒钟，不要晃动； 4、冰水浴中放置 2 分钟，不要晃动； 5、加入 500μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基； 6、置于 37℃摇床中，150-200rpm 震荡复苏培养 60 分钟； 7、取 50-100μl 菌液涂布在含有抗性的 LB 平板上。待液体吸干后，倒置平板，37℃培养 12-16 小时。（当克隆不稳定片段时，为了降低重组错误率，复苏培养和涂布培养最好采用 30℃的培养条件，平板在 30℃ 培养时需要 24 小时左右。）平板划线分离法：复苏培养结束后，12000rpm 离心 30 秒钟，弃掉上清，留 100μl 左右的液体，用 200μl 吸头轻轻吹打散菌块，取 10μl 重悬的菌液分多点滴在抗性 LB 平板上，倾斜吸头，用吸头头部的侧面将滴在平板上的液体来回划线。37℃培养过夜。这个方法可以获得更多更大的单克隆菌落。

储存/保存方法: -70℃保存，避免反复冻融

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