公告提醒:爱必信所有产品和服务仅用于科学研究,不用于临床应用及其他用途提供产品和服务(也不为任何个人提供产品和服务)! 产品描述: 产品名称:T4 DNA Ligase 描述: 在有Mg2+和ATP存在的条件下,T4 DNA Ligase能催化双链 DNA或RNA上相邻的5′-磷酸末端和3′-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化双链DNA的平末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻,但不能催化单链 DNA 之间的连接。 酶储存缓冲液: 10 mM Tris-HCl (pH 7.5) ,50mM KCl,1mM DTT, 0.1mM EDTA,50% (v/v) glycerol。 5 × T4 DNA Ligase Buffer 250 mMTris-HCl (pH 7.5), 50mM MgCl2,50mM DTT, 5mM ATP,连接促进剂。 来源: 纯化于携带T4 DNA ligase 基因 的E. coli 菌株。 浓度: 5U/μl 储存/保存方法: -20℃保存,有效期12个月。 技术指标: 抑制剂和热失活: 大于200mM的NaCl或KCl可以强烈抑制连接酶活性。65℃加热 10分钟或70℃加热5分钟即可失活。 单位定义: 在37℃,20分钟内交换1 nmole 的32PPi所需要的酶量定义为一个Weiss单位。本产品酶1U(Weiss Unit)相当于200个粘性末端单位。在T4 DNA 连接酶反应缓冲液中,16℃条件下,30分钟能够使50%的经Hind III消化的λDNA 片段连接所需要的酶量为一个粘性末端单位。 质量控制: 蓝白斑分析实验表明白斑数小于2%;过量T4 DNA Ligase 混合超螺旋质粒检测实验表明无核酸酶检出;SDS-PAGE检测重组蛋白纯度大于99%。 注意事项: 1、化冻 5×T4 DNA Ligase Buffer 后,需要混匀后再使用。 2、T4 DNA Ligase 最适活性温度为 37℃,但是高温连接形成的连接产物的转化效率会大大降低,所以选用 25℃或 16℃等稍低的连 接温度。如果连接产物不用转化且需要高的连接效果,可以在 37℃条件下进行。 3、该酶需要 Mg 2+为激活剂,因此螯合 Mg 2+的 EDTA 的存在会阻碍连接反应。溶解于高浓度 EDTA 缓冲液的 DNA 需要用灭菌水或 TE 缓冲液进行置换。 产品信息订购:
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