人源Fab抗体文库构建

人源Fab抗体文库构建

报价:面议
型号: 2
产地: 天津
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抗体文库制备服务 – 人源Fab抗体库构建服务
       

      获得杂交瘤单克隆抗体序列信息是进行抗体重组改造,抗体药物发现的基础;抗体的Fab片段保留了抗原结合区域,分子量是抗体全长的1/3,具有较好的组织渗透性,常用作导向药物载体及显影等。

       构建Fab抗体文库是获得高质量,高亲和力药物抗体的有效途径之一,高库容量(109-1012)的噬菌体展示Fab抗体文库极大提升了抗体工程改造速度,如重组人单克隆抗体,嵌合抗体的制备速度。
      卡梅德生物运用先进的理念和技术,设计和开发了特有的方案,能够获得高度一致性的单核细胞克隆。通过自有高效的噬菌体展示技术,根据客户的项目需求(展示的蛋白或抗体片段的大小等参数),我们会采用不同的噬菌体系列进行文库构建,为客户提供快速高效的人源抗体服务,节约客户宝贵的时间和经费。


项目流程:

 

步骤

服务内容

周期

外周血单核细胞单克隆化

1.获取外周血单核细胞

2.单核细胞敏化

3.EBV病毒单克隆化

4.流式细胞分选后单克隆培养

8-12周

抗体cDNA制备

(客户可以提供细胞)

1. 总RNA提取

2. 高保真RT-PCR制备cDNA

3. 系统对照:Actin特异引物PCR扩增,以鉴定逆转录产品cDNA质量

构建抗体库

1. 引物设计与合成:抗体可变区兼并引物设计、合成

2. 以cDNA为模板,PCR扩增抗体重链和轻链可变区基因

3. scFv基因拼接

4. 噬粒构建与转化:酶切、连接scFv和噬菌粒载体,电击转化TG1宿主菌,构建抗体库

5. 鉴定:随机挑选20-50个克隆,PCR鉴定阳性率,测序和分析抗体序列

6. 包装,>1?1013噬菌体颗粒/ml

交付

*构建报告,包括详细建程序,代表性序列信息。

*产品交付:细菌和噬菌体两种形式抗体库。

注 :1.客户提供人外周血淋巴细胞,淋巴结细胞或脾脏细胞(保存在RNA later等溶液中,避免RNA降解,蓝冰运输),从第二步开始制备Fab抗体文库,只需8-9周即可完成。

2. 采用TriZol溶液制备细胞裂解物,干冰运输。 


技术服务优势:
*免疫,天然和合成抗体噬菌体文库构建
*周期短:预制抗体文库筛选服务
*高库容量:独立克隆数 107 - 1012
*高亲和力抗体制备:10-7 - 10-13
*多种噬菌体展示系统:M13,T4,T7
*个性化的淘筛策略
*严禁完整的QC标准


卡梅德生物科技(天津)有限公司真诚期待与您的合作!




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