使用蛋白质检测仪检测奶酪中蛋白质含量的实验操作步骤

2023/08/24   下载量: 0

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应用领域 食品/农产品
检测样本 其他乳制品
检测项目 营养成分>蛋白质
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以下是检测奶酪中蛋白质含量的常见实验操作步骤,使用蛋白质检测仪(例如Bradford法): 材料准备: 奶酪样品 蛋白质提取缓冲液(例如Tris-HCl缓冲液) BSA(牛血清白蛋白)标准溶液 Bradford蛋白质试剂盒(包括试剂和试剂盒说明) 离心管、显微管、分光光度计

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以下是检测奶酪中蛋白质含量的常见实验操作步骤,使用蛋白质检测仪(例如Bradford法):


材料准备:


奶酪样品

蛋白质提取缓冲液(例如Tris-HCl缓冲液)

BSA(牛血清白蛋白)标准溶液

Bradford蛋白质试剂盒(包括试剂和试剂盒说明)

离心管、显微管、分光光度计

实验步骤:


样品制备:

a. 将奶酪样品称量,然后用蛋白质提取缓冲液进行均匀混合。可以根据样品量的不同来调整缓冲液的用量。

b. 将混合样品离心,分离出上清液。


准备标准曲线:

a. 准备一系列BSA标准溶液,浓度从低到高(例如0、1、2、4、8、10 mg/mL)。

b. 取一部分每个标准溶液,将其分别加入到离心管中,使得各个标准点的体积相同。


添加试剂:

a. 将标准溶液和奶酪样品上清液分别加入显微管中,每个样品设置多个重复。

b. 对于每个样品,加入足够的Bradford试剂,使样品与试剂的比例适当。


混合和孵育:

a. 轻轻混合样品和试剂,确保充分混合。

b. 让显微管中的混合物在室温下孵育一段时间(通常约15分钟),使蛋白质与试剂发生反应。


测定吸光度:

a. 使用分光光度计设置波长,通常在595 nm附近,以测量各个标准溶液和样品的吸光度。

b. 先对零浓度标准(纯缓冲液)进行基线校准,然后测量其他标准点和样品的吸光度。


构建标准曲线:

a. 将各个标准点的吸光度值绘制在纵坐标上,标准溶液的浓度绘制在横坐标上,得到标准曲线。

b. 通过标准曲线,将样品的吸光度值转换为相应的蛋白质浓度。


计算样品中的蛋白质含量:

根据标准曲线,计算样品中的蛋白质浓度。可以根据孵育后的吸光度值,通过标准曲线的公式计算蛋白质含量。


结果分析:

根据计算得到的蛋白质含量,可以进行样品间的比较和分析。


请注意,实验步骤中的具体细节可能因试剂、仪器和实验室条件而有所不同。在进行实验前,请务必阅读所使用蛋白质检测仪和试剂盒的说明书,以确保正确操作和获得准确的结果。


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