供货周期: | 一周 |
品牌: | 智立中特 |
规格: | 支 |
货号: | zl-056477 |
CAS号: |
HUV-EC-C人脐静脉血管内皮细胞的处理方法!
一、细胞简介:
细胞名称:HUV-EC-C[HUVEC](人脐静脉血管内皮细胞)(STR鉴定正确)
别称HUV-EC-C;HUVEC
背景描述:HUV-EC-C[HUVEC]细胞可用于血管内皮修复损伤的研究。
组织来源:脐静脉/血管内皮
生长特性:贴壁细胞
细胞形态:上皮细胞样
生物安全等级 1
生长培养基 Ham'sF-12K+0.1mg/mlHeparin+0.03-0.05mg/mlECGs+10%FBS+1%P/S
推荐传代比例 1:2-1:4
推荐换液频率 2~3次/周
倍增时间 ~23.5hours
冻存条件
冻存液:55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
致瘤性 No,thecellswerenottumorigenicinimmunosuppressedmice.Yes,thecellsdidformcoloniesinsemisolidmedium.
基因表达情况 factorVIII
二、人脐静脉血管内皮细胞的培养步骤
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。弃培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入到冻存液中。
三、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2、加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3、轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4、按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6ml培养液的新皿中或者瓶中。
四、人脐静脉血管内皮细胞收到后的处理方法
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松)
智立中特(武汉)生物科技有限公司是一家集生物研发,生产,销售,售后为一体的高新技术产业公司。拥有载体质粒,载体,国内外微生物菌种资源,感受态细胞,培养基,细胞株等广泛的生产销售线。
通过产品研发的不断创新,服务质量不断提高,赢得了广大生命科研用户的信赖。并为工业农业等领域提高微生物产品和技术解决方案从而成为可信赖合作伙伴。
质粒载体产品:
提供各种类型载体宿主,基因种属类型,抗性,设计并构建质粒:大肠杆菌表达载体;哺乳动物表达载体;酵母表达载体;昆虫表达载体;植物表达载体;广;腺病毒载体...常用有pACYC184;pACYCDuet-1;pASK-IBA5plus+FUS(人基因);pAX01;pBABE-Puro;pBAD24
pBI121;pBIFC-bFosVC155;pBIFC-VC15;pCDFDuet-1;pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro;pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puro;pBIFC-VN155(I152L)addgene27097;pCDH-MSCV-MCS-EF1-copGFP-T2A-Puro;pCAGGS;pBiFC-VN173(Plasmid#22010);pBlueScriptSK(+);pBlueScriptIISK(+);pBV220;pCas;pCas9
pBR322;pBT3-STE;pBudCE4.1以及结合转移质粒RP4;pGL4.25[luc2CP/minP];pGR106;pIRES2-AcGFP1-Nuc;psfGFP;pHEN1;pNL1.1[Nluc];pBBR1-GFP;pBMTB-5;pBMTB-4;pBMTB-3;pBMTB-2;pCAMBIA0305.1;pCX-DR;;pGreenII0800-miRNA;pK7GWIWG2(I);pRARE;pDG1663
质粒菌种产品:
E.coliNissle1917;USA300:大肠杆菌JM108;希瓦氏菌属MR-1;E.coliW3110野生型;酿酒酵母W303a;酿酒酵母invsc1;酿酒酵母BY4741;酿酒酵母BY4742;毕赤酵母SMD1168H;PseudomonasputidaKT2440;E.coliMC1061;枯草芽孢杆菌WB800;根癌农杆菌EHA105;根癌农杆菌GV3101;CEN.PK2-1D;CEN.PK2-1C;全耐药鲍曼不动杆菌;哈维弧菌BB170
菌种产品:
提供模式菌种,科研菌种,普通菌种等菌种资源,有证质控样品等微生物标准品,芽孢悬液。常用药典菌种如:大肠埃希氏菌CMCC(B)44102、黑曲霉CMCC(F)98003,白色念珠菌CMCC(F)98001,枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501,铜绿假单胞菌CMCC(B)10104,生孢梭菌CMCC(B)64941;常用益生菌:长双歧杆菌(Bifidobacteriumlongum),嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus),鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus),类干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei),干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei);常用真菌:松口蘑Tricholomamatsutake,灰葡萄孢bio-81601cfcc50437Botrytiscinerea;灵芝,香菇,茯苓等
原代细胞和细胞系产品:
现取不同组织现分:不同来源人/鼠/兔/猪等不同组织如肺、气管、支气管、甲状腺、胰腺、垂体、肾上腺、扁桃体、胸腺、肾、膀胱、输尿管、前列腺、心脏、血管。常用原代细胞有:气管上皮细胞;前列腺上皮细胞;膀胱上皮细胞;输尿管上皮细胞;肾足细胞;内皮祖细胞;输卵管上皮细胞;乳腺上皮细胞
公司提供细胞系人源做过STR鉴定,其他做过种属鉴定,确保产品无误后方可提供客户,形式冻存或复苏节省客户时间;确保实验顺利。常用细胞系有:WB-F344细胞;RG2[D74]细胞;NRK细胞;A7r5细胞;L6细胞;UMNSAH/DF-1细胞;MDBK(NBL-1)细胞;MDBK细胞;CCC-SMC-1细胞;PtK1(NBL-3)细胞;Mv1Lu细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)细胞;F81细胞;CRFK细胞;MLTC-1细胞;MS1细胞;C3H/10T1/2,Clone8细胞;GL261细胞;P3X63Ag8.653细胞;HCC38细胞;ZR-75-30细胞;SK-LU-1细胞;NCI-H2087细胞;SK-N-MC细胞;Hs895.T细胞
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