供货周期: | 一周 |
品牌: | 智立中特 |
规格: | |
货号: | zl-056904 |
CAS号: |
背景描述T-47细胞分离自一位54岁乳房侵入性导管癌的女性患者胸水;发现分化的上皮亚株(T-47D)有细胞质连接和17-β-雌二醇及其他类固醇降血钙素的受体,T-47D细胞表达WNT7B癌基因。
种属人类
年龄(性别)女性,54岁
组织来源乳腺;乳房;导管;来自导管癌肋膜渗出液转移灶
生长特性贴壁细胞
细胞形态上皮细胞样
生物安全等级1
生长培养基RPMI-1640+0.2U/mlInsulin+10%FBS+1%P/S
推荐传代比例1:2-1:4
推荐换液频率2~3次/周
倍增时间~36-46小时
冻存条件
冻存液:55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
致瘤性Yes,formscoloniesinsoftagar.
受体表达情况calcitonin,expressed;androgenreceptor,expressed;estrogenreceptor,expressed;progesteronereceptor,expressed;glucocorticoidreceptor,positive,expressed;prolactin,expressed;calcitonin;androgenreceptor,positive;progesteronereceptor,p
细胞处理:
1)冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加入0.25%(w/v)胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。
3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3)细胞冻存:收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
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