治疗类生物药品含量测定>色谱法, 质谱法检测 | 采用 Agilent 1200 系列 RRLC 系统和 Agilent 6460 三重串联四极杆液/质联用系统分析 PAMPA 样品-天津市普伦科技开发有限公司

方案摘要

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应用领域	制药/生物制药
检测样本	治疗类生物药品
检测项目	含量测定>色谱法, 质谱法
参考标准	无

本应用文摘描述了联用 Agilent 1200 系列快速分离液相色谱系统和 Agilent 6460 三重串联四极杆液/质联用系统来分析平行人工膜渗透性测定（PAMPA）样品，所分析的每个样品包含四种目标化合物。采用 MassHunter Optimizer 软件确定强度最大的产物离子、最佳碎裂电压和碰撞能量。该实验测定了分别属于四类不同药物的十种药物化合物的表观渗透值。

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配置单

二手翻新agilent安捷伦1200液相色谱仪
型号：1200

¥12万
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方案详情

实验部分

化学药品

本研究采用购自西格玛奥德里奇公司（印度班加罗尔）的阿替洛尔、拉贝洛尔、美托洛尔、普萘洛尔、丁螺环酮、奈法唑酮、去甲替林、丙咪嗪、曲米帕明和地昔帕明；购自 Lab-Scan 公司的 HPLC 级乙腈和甲醇；以及购自 Fluka 公司的甲酸。目标分析物的储备液和合适的稀释液采用甲醇配制，以进行方法开发。

样品制备与 PAMPA 方案

采用正己烷为溶剂配制体积比为 5% 的十六烷溶液，在过滤（供体）板（Millipore 的渗透实验用多层筛过滤板）每个微孔的滤膜上加入等份试样。将供体板干燥，确保正己烷蒸发。将测试化合物溶于 DMSO，得到 10 mM 的终浓度，然后用 10 mM 磷酸盐缓冲液（pH 7）稀释到 10 µM，使得 DMSO 终浓度为 5%。将 300 µL 含 5% DMSO 的 10 mM 磷酸盐缓冲液（PH=7）加入受体板每个微孔中。将另外的 300 µL 含有测试化合物和 5% DMSO 的 10 mM 磷酸盐缓冲液（PH=7）加入供体板微孔中。将荧光指示剂萤黄加入测试化合物溶液，用来追踪膜的完整性。将供体板嵌入受体板，然后在潮湿环境下室温孵育 5 小时。分析标准品采用测试化合物溶液配制。地昔帕明是一种渗透性已知的化合物，将其加到每个微孔板上作为对照。采用甲醇作为终止液。孵育期结束时，将供体板从受体板取出，并将样品合并，使其含有四种分析物。采用液相色谱/串联质谱对测试化合物在供体孔、受体孔以及平衡孔中的浓度进行定量。

仪器设备

实验采用 Agilent 1200 系列快速分离液相色谱系统和 Agilent 6460 三重串联四极杆质谱仪；该液相色谱系统包括真空脱气机、二元泵、具有温度控制功能的高效自动进样器以及柱温箱。质谱仪在应用安捷伦喷射流技术的电喷雾模式下运行。安捷伦 MassHunter Optimizer （B.02.00）软件用于确认丰度最高的 MRM 离子对以及相关碎裂电压和碰撞能量。安捷伦 MassHunter 工作站（B.02.00 版本）用于数据采集， MassHunter 定量分析软件（B.01.04 版本）用于数据分析。

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文献贡献者

天津市普伦科技开发有限公司

银牌会员丨第2年

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