治疗类生物药品含量测定>色谱法检测 | Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统用于高盐缓冲液应用领域的可行性-天津市普伦科技开发有限公司

方案摘要

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应用领域	制药/生物制药
检测样本	治疗类生物药品
检测项目	含量测定>色谱法
参考标准	.

在本应用简报中，我们展示了利用阴离子交换色谱法，在使用四种不同的高盐洗脱缓冲液（最大浓度为 2 M）进行线性和阶梯梯度洗脱条件下，对四种蛋白质进行分离的相关信息。Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统的流路设计中未采用铁/钢质材料，因此可耐受生物分析和生物纯化应用中的严苛条件，从而保持其出色的 UHPLC 性能。使用四种盐（氯化钠 (2 M)、氯化钾 (1 M)、乙酸钠 (1 M) 和四甲基氯化铵 (1 M)）进行线性梯度洗脱时，均可获得极高的保留时间和峰面积精确度。此外，使用 2 M 氯化钠作为洗脱缓冲液时，结果表明保留时间和分离度可保持稳定达 48 小时以上。在此类条件下，采用不锈钢材质的液相色谱系统会面临一些问题，例如盐引起的腐蚀，因此需要执行特殊的、繁杂的清洗步骤。使用 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统则可以完全避免此类清洗步骤，从而提高生物分析或生物纯化应用的通量和效率。

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配置单

二手翻新安捷伦1260液相色谱仪
型号：1260

¥20万
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方案详情

在诸如离子交换 (IEX) 或体积排阻色谱 (SEC) 法中使用的高盐流动相，对于不锈钢材质的液相色谱系统而言是一项严峻挑战。由于长期使用含盐缓冲液所引发的腐蚀效应，导致此类液相色谱系统存在损坏的风险。其结果就是需要执行繁杂的清洗步骤。因此，强烈建议使用不含铁的系统，避免受到高盐浓度的影响。 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统在样品流路中不含金属成分。自动进样器、柱温箱和检测器流路中所有的毛细管和接头均完全是不含金属的，因此，生物分子只与陶瓷或 PEEK 管线接触。这使得用户可以使用高盐含量的缓冲液。此外，相对于 Agilent 1260 Infinity 液相色谱系统而言，该系统可在较宽的 pH 范围（1-13，短时间分析可以高达 14）内保持稳定1 。在本应用简报中，以阴离子交换色谱 (AEX) 为例，论证了将 Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统用于高盐应用的可行性。利用阴离子交换色谱 (AEX) 对四种蛋白质混合物进行分离，其中使用了四种不同的洗脱盐：氯化钠 (2 M NaCl)、氯化钾 (1 M KCl)、乙酸钠 (1 M CH3COONa) 和四甲基氯化铵 (1 M [(CH3)4N]Cl)。在线性和阶梯梯度条件下，分别分析了保留时间和峰面积的精确度。此外，还使用 2 M NaCl 洗脱缓冲液考察了保留时间和峰面积的长时间稳定性（48 小时）。

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文献贡献者

天津市普伦科技开发有限公司

银牌会员丨第2年

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Agilent 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统用于高盐 缓冲液应用领域的可行性

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