全血/血清/血浆生化检验>定性定量分析检测 | 采用Agilent Bond Elut Plexa PCX 和Agilent Poroshell 120 色谱柱对全血中的丁丙诺啡和去甲丁丙诺啡进行LC MS MS 分析-天津市普伦科技开发有限公司

方案摘要

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应用领域	医疗/卫生
检测样本	全血/血清/血浆
检测项目	生化检验>定性定量分析
参考标准	.

法医和疼痛科实验室进行全血中丁丙诺啡和去甲丁丙诺啡的检测时，需要一种能在浓度低于 1 ng/mL 的水平内可靠检测这些化合物的分析方法。一种简单的样品净化步骤，结合使用离子对 468.2&55.1 和 414.2&83.1 的 LC/MS/MS 方法，可实现两种分析物的检测限（LOD）低于 0.1 ng/mL。每种分析物校正曲线的线性范围为 0.2 到 20 ng/mL，其 R2 等于或大于 0.999。采用安捷伦新一代产品分析可获得更高的检测灵敏度。这些产品包括 Agilent Bond Elut Plexa PCX 混合模式聚合物 SPE 吸附剂、 Agilent Poroshell 120 EC-C18 2.7 μm 表面多孔填料 LC 柱、Agilent 1200 Infinity LC 系统、以及配备了安捷伦喷射流技术（AJST）增强型电喷雾离子源的 Agilent 6460 三重四极杆 LC/MS 系统。

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配置单

二手翻新安捷伦1260液相色谱仪
型号：1260

¥20万
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方案详情

丁丙诺啡是一种半合成的鸦片样药物，用于治疗慢性疼痛，以及作为美沙酮的替代品治疗阿片成瘾。作为镇痛剂，丁丙诺啡的效果大约是吗啡的 25 到 40 倍。丁丙诺啡的结构与吗啡相似，但疏水性更强（见图 1）。丁丙诺啡在肝脏中存在 N-脱烷基化反应，产生其主要活性代谢物——去甲丁丙诺啡。丁丙诺啡和去甲丁丙诺啡在血液中的浓度非常相近，50% 以上病例中的浓度低于 1 ng/mL（Selden 等，2011），给分析人员的检验带来了极大的挑战。此外，由于这些分析物分子结构稳定性强，碰撞诱导裂解产生的碎片量少，因此对这些化合物进行 MS/MS 分析很困难。为了实现检测灵敏度低于 1 ng/mL，检测这些化合物的分析方法不仅要有出色的 MS 性能，还要有一个回收率高、离子抑制低的有效样品净化程序。我们使用 SPE 处理的全血提取物洁净度高，较容易地实现了检测限低于 0.1 ng/mL。与其它聚合物吸附剂不同，所有 Agilent Bond Elut Plexa 系列产品的颗粒均具有不含氨基的羟基化表面，消除了对蛋白质的吸附，从而获得了最低的离子抑制和最高的检测灵敏度。又由于填料粒径分布窄且没有粉末造成堵塞，还实现了高流速和良好的重现性。利用该方法可实现分析物的良好分离和极佳的峰形，这是采用 Agilent Poroshell 120 系列色谱柱进行分析的特色。采用表面多孔的 2.7 µm 填料，这些色谱柱具有与亚 2 µm UHPLC 色谱柱相似的柱效，但背压却降低了约 40%。这就允许用户甚至可以使用 400 bar LC 系统来提高分离度，并且通过使用更高的流速来缩短分析和再平衡时间。本文定量分析使用的经鉴定具有最高丰度的新离子对是 468.2 > 55.1 （丁丙诺啡）和 414.2 > 83.1（去甲丁丙诺啡）。该方法仅需 0.5 mL 血样，采用 10 µL 较低的进样体积和提取时 5 倍预浓缩，即可在 0.2 ng/mL 浓度时实现良好的信噪比：丁丙诺啡为 84 : 1，去甲丁丙诺啡为 20 : 1（见图 2）。

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文献贡献者

天津市普伦科技开发有限公司

银牌会员丨第2年

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