普洱中农药多残留检测的固相萃取方法

一、实验目的

（superclean gcb/nh2）

本研究利用固相萃取作为样品前处理方法，gc-ecd 和 lc-ms/ms 作为分析方法，检测普洱中的农药残留水平。该方法操作简便，可简化样品前处理过程，减少有机溶剂的使用。二、应用范围

本方法适用于茶叶中有机磷类、有机氯类、拟除虫菊酯类和氨基甲酸酯类农药多残留的测定。

三、实验材料

nuanalytical superclean gcb/nh2 固相萃取柱 500 mg/500 mg/6 ml。四、实验方法

1、样品提取

称取粉碎好的普洱 2 g(精确到 0.001 g)，加入 50 ml 离心管中，加入 10 ml 乙腈，剧烈振荡 1 min，静置 30min，4000 r/min 离心 5 min。上清液待净化。

2、spe 柱活化

gcb/nh2 固相萃取柱中加入约 2 cm 高无水硫酸钠，使用前使用 10 ml 乙腈-甲苯(3:1，

v/v)活化。

3、上样和洗脱

当溶液液面到达柱吸附层表面时，立即倒入上述待净化溶液 4     ml,  用鸡心瓶接收流出液，逐步加入 25 ml 乙腈-甲苯(3:1，v/v)洗涤小柱，收集上述所有流出液于鸡心瓶中。

4、重新溶解

流出液于 40  ℃水浴中旋蒸至 1  ml 左右，加入 2   ml 乙腈转移至 10  ml 试管中，于40 ℃下氮气吹干，加入 1 ml 乙腈溶解残渣，0.22 μm 微孔滤膜过滤，分别供 gc-ecd 和lc-ms/ms 上机测试。

5、仪器条件

（1）、 gc-ecd 条件

气相仪器：agilent 7890a            色谱柱：fb-5, 30 m×0.32 mm, 0.25 μm

进样口温度：220  ℃          检测器温度：300  ℃

升温程序：180 ℃(保持 2 min)；以 10  ℃/min 升温到 230 ℃(保持 2 min)；以 2 ℃/min

升温到 260 ℃(保持 2 min)；以 25  ℃/min 升温到 270 ℃(保持 1.6 min)

载气：氦气      流速：1.6 ml/min              进样方式：分流进样（分流比 10:1）

（2）、lc-ms/ms 条件

质谱仪：api 4000            色谱柱：superlu c18(2.0 mm×150 mm, 5 μm)

流动相：a: 0.1%甲酸+10 mm 乙酸铵(1 ml 甲酸+0.77 g 乙酸铵溶于 1 l 水中)；b:  甲醇

洗脱方式：梯度洗脱，洗脱程序如下：

流速：0.35 ml/min             柱温： 40 ℃           进样体积：5 μl

离子源：电喷雾(esi)         扫描模式：正离子模式   检测方式：多反应监测(mrm) 质谱仪离子源参数如下： 

氨基甲酸酯类农药各组分名称、保留时间及母离子和子离子检测离子对如下： 

五、实验结果

1、普洱中农药多残留的添加回收结果

表 1 0.25 mg/kg 普洱中有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留的添加回收结果

表 1 0.05 mg/kg 普洱中氨基甲酸酯类农药多残留的添加回收结果

2、普洱中农药多残留检测色谱图

图 1    添加水平为 0.25 mg/kg 普洱中有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留检测色谱图

图 2    添加水平为 0.0625 mg/kg 普洱中氨基甲酸酯类农药多残留检测色谱图