导读:2017年9月18日,在第十六届人类蛋白质组学年度世界大会(HUPO)上,Bruker推出了用于PASEF质谱的timsTOF Pro系统。该质谱采用了专有捕获离子迁移谱(TIMS)技术,能实现更高速度、更高灵敏、更强大的鸟枪法蛋白质组学分析,具有出色的单次肽和蛋白质鉴定性能。
2017年9月18日,在第十六届人类蛋白质组学年度世界大会(HUPO)上,Bruker推出了用于PASEF质谱的timsTOF Pro系统。该质谱采用了专有捕获离子迁移谱(TIMS)技术,能实现更高速度、更高灵敏、更强大的鸟枪法蛋白质组学分析,具有出色的单次肽和蛋白质鉴定性能。
基于TIMS创新技术的四极杆飞行时间质谱仪(QTOF-MS)由MaxQuant / Perseus和PEAKS Studio蛋白质组学分析软件支持,这种timsTOF Pro方法对于定量蛋白质组学工作流程尤其有利。
从较小样品量的识别性能方面,这种独特的前端TIMS分析仪对更高速度的鸟枪法蛋白质组学进行了优化。其独特的双TIMS几何形状允许离子在第一个TIMS部分中并行累积,并且在实时执行额外的TIMS分离步骤之后,离子从第二个TIMS部分释放出来,用于MS / MS碎裂。这可以产生近100%的占空比,使得这种平行堆积和连续碎裂(PASEF)技术在酶促消化产生的蛋白质混合物中,应用可重复纳流LC-MS分析可以具有前所未有的性能。
PASEF能力代表了性能的改进,因为它提供更高灵敏度和更高速度的鸟枪法蛋白质组学分析,而不损失质量分辨率。而之前,更高的扫描速度通常导致用于鸟枪法蛋白质组学的基于FT的质谱技术具有较低质量分辨率。这些临界限制可以由PASEF消除,允许以高灵敏度以及接近100%的占空比,同时还可以保持前体和产物离子的超高质量分辨率。双TIMS技术这一重要PASEF功能,有助于科学家们深入研究细胞复杂生物学以及发现重要低水平生物学蛋白。同时,这一功能也有助于蛋白质翻译和临床蛋白质组学研究中的验证和纵向研究。
定量蛋白质组学是蛋白质组学研究的关键领域,双重TIMS供电的PASEF提供了超越传统门控时间串联FT的质谱分析局限性的优势。新的timsTOF Pro提供超过四个数量级的动态范围,低肽负载(100-200ng),这使得它非常适合于研究细胞生物学和临床中经常遇到的小细胞群体和低样品量的蛋白质组学。
德国马丁斯堡的马克斯·普朗克生物化学研究所蛋白质组学和信号转导系主任马蒂亚斯·曼(Matthias Mann)表示:“我的实验室与布鲁克合作开发PASEF技术,我们很高兴看到timsTOF Pro实现我们最初设想的鸟枪法蛋白质组学的潜力。这种新技术有可能革新蛋白质组学的几个领域:临床研究,其中速度和定量能力是运行大样本队列的关键;需要增加灵敏度的应用;富含磷酸肽或其中有限数量的细胞可用于分析的样品;并且对于使用等压标记的定量实验,其中使用捕获的离子迁移率的额外分离可以至少部分地消除引起所谓的比例压缩效应导致不可接受的误差的共分裂物质的干扰。我们对技术进一步发展的潜力感到非常兴奋。“
Bruker Daltonics的Omics解决方案副总裁Gary Kruppa表示:“蛋白质组学研究人员总是希望提高速度,灵敏度和定量能力,同时保持高分辨率,准确的质量和高保真度同位素图案,以便更深入地了解蛋白质组。使用PASEF,科学家们现在不需要将扫描速度和敏感度的解决方案进行权衡,它们通过TIMS前体离子选择获得高灵敏度,高扫描速度和无与伦比的特异性这三重效果。这提供了发现低水平生物相关蛋白质的可能性,目前它们是超出了非TIMS质谱仪的性能范围的。“
马丁·马克斯普朗克生物化学研究所计算系统生物化学小组组长Juergen Cox评论说:“Bruker决定采用开放文件格式,以便我们可以直接使用原始数据,将有利于蛋白质组学研究人员的使用MaxQuant和Perseus软件平台。我们对数据质量特别重视,并期待与Bruker合作,通过最先进的客户支持软件和分析统计查询,我们可以使用PASEF在timsTOF Pro上获取数据。“
关于带有PASEF的timsTOF PRO
专有的timsTOF Pro系统使用通过捕获离子迁移光谱(TIMS)实现的PASEF,为鸟枪法蛋白质组学提供了行业领先的数据采集速度。 timsTOF Pro的独特双TIMS几何结合了TIMS设备中离子包的时间聚焦,意味着PASEF提供的速度优势同时提高了灵敏度和定量。所有这些在速度,灵敏度和定量方面的增益保持了Bruker的高性能QTOF质谱仪的优势,包括高质量分辨率(即使在最高数据采集速率下,分辨率为50,000 FWHM),ppm精确质量和高同位素保真度(True同位素模式或TIPTM)。具有PASEF的强大的timsTOF Pro为科学家提供了深入细胞机器复杂生物学研究、发现低水平生物学重要蛋白质、在蛋白质翻译以及临床蛋白质组学研究中进行验证提供了有力工具。
关于MaxQuant和Perseus软件平台
MaxQuant是猎枪蛋白质组学数据分析的行业标准。 Juergen Cox在过去十年发展起来,已经成为肽,蛋白质和翻译后修饰的鉴定和定量最常用的包装。近期,MaxQuant已经适应于timsTOF数据的分析,管理由保留时间、离子迁移率、质量和信号强度所占据的空间中的4D特征。用于多元数据分析的Perseus软件支持生物和生物医学研究人员解释分子定量,相互作用和蛋白质翻译后修饰数据。 Perseus包含用于高维数据分析的统计工具的综合组合,涵盖归一化,模式识别,时间序列分析,跨学科比较和多重假设检验。
关于PEAKS Studio
生物信息解决方案公司的旗舰软件PEAKS Studio为蛋白质组学研究界提供了创新的质谱数据分析工作流程。自从在二十世纪初期首次亮相以来,PEAKS Studio已被高度认可,其基准测试从头测序算法被集成到所有其他鸟枪法蛋白质组学软件模块中。从头测序与传统数据库检索的结合确保了对原始光谱数据的完整解释,以满足质谱的复杂性和灵敏度,并为蛋白质组学和治疗性蛋白质发现提供了先进的解决方案,如通过肽/蛋白质鉴定和定量,肽图,翻译后修饰和序列变体。
PEAKS Studio提供的独特工作流程以及由timsTOF Pro的第四维离子迁移率引起的令人信服的数据质量促成了生物信息解决方案公司和Bruker的合作。
关于布鲁克公司(纳斯达克股票代码:BRKR)
55多年来,布鲁克已经使科学家们能够突破发现,开发新的应用,提高人类生活质量。 Bruker的高性能科学仪器和高价值分析和诊断解决方案使科学家能够在分子,细胞和微观层面探索生命和材料。
通过与客户的密切合作,Bruker在生命科学分子研究,应用和制药应用以及显微镜,纳米分析和工业应用方面实现了创新,生产力和客户成功。近年来,Bruker也成为细胞生物学,临床前成像,临床表现学和蛋白质组学研究,临床微生物学和分子病理学研究的高性能系统的提供者。
来源于:仪器信息网
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