Venusil HILIC亲水作用色谱柱
亲水作用色谱(Hydrophilic Interaction Chromatography,HILIC)是近年来色谱领域研究的热点,博纳艾杰尔科技推出丙基酰胺键合硅胶为基质的HILIC色谱柱, 对极性化合物,如极性代谢物,碳水化合物或肽具有极佳的分离效果。
丙基酰胺键合硅胶克服了传统正相色谱柱在水相条件下不稳定的缺点,其常使用流动相是和反相色谱相同的水相缓冲液(< 40%)及有机溶剂,但是其梯度条件通常是初始为高比例有机相,逐步加大水相含量;极性丙基酰胺键合硅胶的HILIC色谱柱在反相条件下,可以有效的保留极性化合物,是一种崭新的极性化合物HPLC分离解决方式.
图1. Venusil HILIC 比传统正相色谱柱更稳定
样 品:VB1, VB6, VC, VB2
老化条件:甲醇:20 mM NaH2PO4 (pH=7.0) = 40 : 60; 1.0mL/min;温度:40℃;
分析条件:0.1%TFA:ACN = 90:10 ; 流速: 1.0mL/min; 温度:30℃ ,UV280nm
色谱柱: Atlantis C18 4.6×250mm,5μm
流动相:98%的0.005M的磷酸 钠 (pH=7):2% 甲醇
流 速: 1ml/min
柱 温: 25℃
检 测: UV 210nm
色谱柱:Venusil HILIC 4.6×250mm,5μm
流动相: A: 0.1%TFA水溶液,
B: 乙腈,
A:B=75:25
流 速: 1 mL/min
温 度: 25℃
检 测: UV 210 nm
图2. Venusil HILIC与C18分离井冈霉素对比色谱图
图2. 结果显示,反相C18在98%的水相条件下,几乎没有保留的强极性化合物井冈霉素,在25%的乙腈条件下,使用丙基酰胺键合硅胶的Venusil HILIC得到了很好的分离。所以,Venusil HILIC色谱柱是强极性化合物分离的有力工具。
丙基酰胺键合硅胶的HILIC色谱柱用于低聚糖的分析,显示出比氨基柱更好的稳定性,更好的分离效果,尤其在使用ELSD检测器的时候,丙基酰胺键合硅胶比氨基键合硅胶具有更低的背景噪音,图3。
图3. 丙基酰胺键合硅胶HILIC色谱柱与氨基键合硅胶柱分离葡萄糖对比
样品:葡萄糖标准品(购至Sigma)
检测:ELSD
色谱柱:4.6×250mm,5μm
色谱条件:乙腈/水(80:20),1mL/min,30℃
图3显示,丙基酰胺键合硅胶填充的HILIC色谱柱可以将葡萄糖在水溶液中存在的两个端基异构体(即α-D-葡萄糖和β-D-葡萄糖)区分开,而用氨基柱则只能得到一个相对较宽的色谱峰,结果表明了丙基酰胺键合硅胶HILIC柱在分析糖类成分方面的独特优势。
腺苷类强极性抗肿瘤药物地西他滨(Decitabine)在普通的反相C18色谱柱上检测有关物质存在杂质分离度不够或检测不出的问题,使用丙基酰胺键合硅胶的Venusil HILIC色谱柱获得了极佳的分离效果,图4。
图4. 地西他滨有关物质分析色谱图
Venusil HILIC(丙基酰胺键合硅胶),4.6×150mm,5μm,乙腈:水=96∶4,1ml/min,
UV@244nm,室温
来源于:天津博纳艾杰尔科技有限公司
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