供稿:Sophia
编辑:Joanna
图片来源于网络
食物中致病微生物的鉴定是公共卫生关注的焦点。据估算,美国每年有六分之一的人会遭受食物中毒,2011年,因大肠埃希氏菌Escherichia coli O157爆发,导致2138人住院。由于食物中致病微生物含量少,只有经过12~48h的富集培养才能达到传统鉴定方法的检测限(105cfu/ml)。而在这段培养时间内,消费者无法被告知能否食用某种事物,导致致病微生物继续传播。因此建立一种快速鉴定致病微生物新方法迫在眉睫。
近年来表面等离子体共振成像(SPRi)被用于快速检测细菌,这一技术基于芯片表面折射率的变化,可以在非浓缩、无标记的情况下检测到芯片上的探针和样品中靶标蛋白或细胞之间的相互作用。格勒诺布尔大学创新性的使用糖探针代替抗体,再利用SPRi技术在细菌生长期对其进行鉴定,能实现快速鉴定菌株。
图注:含有不同糖探针的芯片?加入不同细菌?
得到特异的SPRi指纹
实验中首先选用7种单糖或二糖与吡咯合成7种吡咯-糖轭合物并提纯,然后将合成物固定到SPRi生物芯片上形成微阵列芯片。后将微阵列芯片放入HORIBA SPRi仪器中,并加入5种浓度为102 cfu/ml的相近大肠埃希氏菌。菌株与糖探针发生相互作用,通过实时检测细菌生长过程中的SPRi信号变化,该方法在10小时内完成了浓度仅为102 cfu/ml的相近菌株E. coli O145和O157的鉴别。
这一装置可以作为诊断工具实现致病细菌的快速鉴定,其灵敏度高、易操作,在未来的食品安全方面有很大的应用潜力。
该工作以《Carbohydrates as New Probes for the Identification of Closely Related Escherichia coli Strains Using Surface Plasmon Resonance Imaging》为题,发表于《Analytical Chemistry》(扫描二维码可直达英文原文)。
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HORIBA科学仪器事业部
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