2020版 《中国药典》盐酸利多卡因注射剂有关物质的分析

盐酸利多卡因是局麻醉、抗心律失常药物，属于酰胺类化合物，这类物质在C18色谱柱分析过程中容易出现拖尾的问题。

我们按照2020版 《中国药典》和EP方法，对盐酸利多卡因注射剂及其杂质2,6-二甲基苯胺、2,6-二甲基氯代乙酰苯胺进行分析，希望能够解决主成分与杂质分离效果差和拖尾的问题。

常规硅胶系色谱柱，由于受到硅胶基材表面残留硅醇基和金属杂质的影响，在分析碱性化合物时普遍易出现色谱峰拖尾的现象。CAPCELL PAK色谱柱凭借填料表面致密的聚合物包被来抑制硅胶基材的影响，因此能得到对称性良好的色谱峰。

我们使用经过包膜处理的 CAPCELL PAK C18 AQ S5 柱，很好地解决了盐酸利多卡因拖尾的问题；同时主峰与杂质的分离也满足要求。

2020版《中国药典》方法

推荐色谱柱： CAPCELL PAK C18 AQ S5 

系统适用性要求：盐酸利多卡因与杂质2,6-二甲基苯分离度满足要求，理论塔板数不低于2000。

按照2020版 《中国药典》的要求，选择经过包膜处理的CAPCELL PAK C18 AQ S5 柱，盐酸利多卡因峰形良好；同时2,6-二甲基苯胺与利多卡因分离度16.49，满足基线分离要求。

图1 盐酸利多卡因与2,6-二甲基苯胺的色谱图

HPLC Conditions

色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ S5;4.6mm i.d.×250mm

流动相：磷酸盐缓冲液：乙腈=50：50（pH8.0）

流  速：1.0 mL / min

温  度：30 °C

检  测：PDA 230 nm

进样量：20 µL

浓  度：盐酸利多卡因样品2mg/mL、系统适用性溶液：50 µg/mL（溶剂为流动相）

注：磷酸盐缓冲液：1mol/L磷酸二氢钠溶液1.3mL，0.5mol/L磷酸二氢钠32.5 mL，用水稀释至1000 mL，摇匀。

EP 9.0方法

推荐色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ S5

目前，EP没有盐酸利多卡因注射剂的相关规定，因此我们参考了EP中盐酸利多卡因的检测方法。

系统适用性要求：主峰（盐酸利多卡因）保留时间约为17min，杂质A（2,6-二甲基苯胺）与主峰的相对保留时间约为0.4，杂质H（2,6-二甲基氯代乙酰苯胺）与主峰的相对保留时间约为0.37，杂质A与杂质H的分离度不小于1.5。

按照EP 9.0的检测方法，对杂质A、H以及盐酸利多卡因混合标准品进行分析，结果如图2所示，杂质H保留时间6.098min，杂质A保留时间7.357min，杂质A、H分离度为5.31，满足二者分离度大于1.5的标准要求。

图2 盐酸利多卡因与杂质A、H的色谱图

HPLC Conditions

色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ S5;4.6mm i.d.×150mm

流动相：磷酸盐缓冲液：乙腈=70：30（pH8.0）

流  速：1.0 mL / min

温  度：30 °C

检  测：PDA 230 nm

进样量：20 µL

浓  度：杂质A：0.5µg/mL、杂质H：5µg/mL、盐酸利多卡因：5µg/mL（溶剂为流动相）

注：磷酸盐缓冲液：4.85g/L磷酸二氢钾溶液。