养好细胞，你就是实验室最靓的仔

细胞培养在各位研究生的日常实验中占据了相当多的时间，你的细胞如果有幸养的很好，真是你好我好大家好，实验事半功倍；细胞培养差的学生，说多了都是泪，自挂东南枝了，一把鼻涕一把泪。

细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用的技术，通过细胞培养既可以获得大量细胞，又可以借此研究细胞的信号转导、细胞的合成代谢、细胞的生长增殖等，那下面进入正题，分享一下细胞培养的秘籍。

以动物细胞为例，动物细胞培养需要的一些特殊条件。

① 加胎牛血清培养基：

动物细胞离体培养常常需要血清。各种细胞合成培养基（如MEM、RPMll640、DMEM）只提供细胞生长所需的各种基础营养物质，包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。血清提供生长必需因子，如激素、微量元素、矿物质和脂肪。根据不同细胞的需求，一般含有10%～20%的血清培养基即可维持细胞较快的生长增殖速度。

② 无菌环境：

无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。使用的各种试剂和耗材要经过高压或紫外线灭菌。严格的无菌操作是养好细胞的必要前提。为防止细胞受到微生物感染，可在培养基中加入双抗。

③ 温度和气体环境：

一般动物细胞在体外培养的适宜温度是37℃，不适宜的环境温度会影响细胞的生长甚至死亡。二氧化碳和氧气的比例要在细胞培养过程中不断进行调节，一般维持在5%。二氧化碳既是细胞的代谢产物，又与维持培养液的pH密切相关。

如何防控污染：保持良好的操作习惯，超净台要紫外灭菌30min，以70%的乙醇擦拭无菌操作台，开启超净台风扇运转数分钟后，才开始实验。

每次只处理一种细胞，以免失误混淆或细胞间污染，操作不要触碰吸管尖头部或容器口等。

像对待孩子一样养细胞，它很脆弱，最好每天关注一下，以免出现培养箱缺二氧化碳，停电、温度不够等现象。

避免全军覆没，好细胞要及时保存，有备用的细胞，这样即使有细胞污染还可以有备用的细胞顶上，不至于太恼火，好习惯要保持。

不同细胞喜好不同，需要在培养中慢慢体会，例如平滑肌细胞比较好长，2-3天可能就会有很多细胞，应该算是比较好养活的；内皮细胞分泌物较多，需要时不时换洗才会长的好等等。

培养好的细胞会被安排不同的实验，有的看趋势、有的看状态、有的看蛋白表达，有的看共定位，最终它们都会和显微镜打交道，那我们就聊聊显微镜和细胞的不解之缘。

根据不同的细胞实验需求，使用的显微镜也不尽相同：

Echo Rebel数字化显微镜，具备明场、相差观察方式和正倒置一体特点。可以观察培养瓶、孔板和培养皿里面的细胞形态，根据细胞状态，您可以及时调整实验条件。同时Echo Rebel数字化显微镜具有自动细胞计数和测量等功能，可以用来细胞计数和做细胞划痕实验，如果您的细胞不涉及到荧光实验，Echo Rebel数字化显微镜基本可以满足你的需求。

▲ 成骨细胞

▲ 细胞计数

Echo Revolve Gen2荧光显微镜具有自动荧光系统可以做到开机即用，一键荧光系统切换，搭配的DHR和Z-Stack功能可以使细胞成像更清晰。即可以做到明场观察细胞形态，同时也可以做GFP蛋白转染的细胞实验。Echo Revolve Gen2荧光显微镜还可以用来检测是否转染进细胞。DHR和Z-Stack的搭配可以更清楚的研究细胞内蛋白分布表达情况等。

Echo Revolution自动化显微成像系统具备Revolve的所有功能并在此基础上升级，使之专为活细胞观察而生。HyperScan高速拼接大视野成像功能，即可以快速扫描整个样品孔又能解决高倍镜下视野小的问题，可以更清晰和整体的观察细胞形态。延时摄影成像功能（TimeLapse）结合自动对焦与长时间锁焦，再搭配活细胞工作站和全自动载物台，可以实现活细胞长时间观察，从而研究细胞的生长和发育过程，对研究干细胞诱导分化成器官的整个过程具有重要意义。而孔板导航成像功能（Multi-well Point）可以对不同孔位进行自定义扫描和观察，研究不同实验条件对活细胞的影响。

培养细胞需要耐心及不断的积累和摸索，了解它们，呵护它们，相信这个小小的细胞会成长的很好。小编就先介绍到这里，我们的显微镜可以申请试用哦，请拨打电话010-57256059联系我们。