凯氮实验常见应用问题分析
凯氏定氮法是测定蛋白质/氮含量的常用方法,该方法简单易操作,但由于实验过程中涉及到的步骤以及使用的试剂较多,因此出现问题后排查起来会费时费力。本文汇总了客户在凯氮实验中常见的应用问题,并逐一分析给出解决方法,旨在帮助客户发现问题并及时排查解决。
问
测定的氮含量偏高可能是哪些原因?
该如何纠正?
1.1 称量误差:
检查天平是否平稳,天平周围是否有其他仪器干扰,是否有静电干扰
1.2 样品或标准品污染:
重新取样,或更换标准品
1.3 玻璃器皿污染:
清洗玻璃器皿
1.4 蒸馏残留:
减少液体总量,300mL 样品管中的样品量应不超过 150mL,以避免样品量过多喷溅严重;在碱加入样品管前,使用水稀释样品管中酸也能减低喷溅程度
1.5 实验环境中有游离氨:
检查进行定氮的实验室是否放置了氨水等含挥发性氨试剂
1.6 滴定剂浓度错误:
检查滴定液的计算和浓度、 摩尔反应系数(每摩尔盐酸含 2 摩尔 H+、每摩尔硫酸含 2 摩尔 H+)、滴定剂系数;对滴定酸进行标定,重新计算
1.7 滴定系统、滴定管、玻璃管中有空气:
检查滴定酸液位,如滴定酸不足及时补充,并在滴定系统上进行排液操作
1.8 pH 电极故障:
使用标准溶液校准电极,必要时进行更换,如使用标准缓
冲盐进行校准多次仍不能通过滴定仪要求则建议更换
1.9 手工滴定指示剂变性:
重新配置母液
1.10 计算错误:
重新计算,更换实验员对实验结果核对
问
测定的氮含量偏低可能是哪些原因?
该如何纠正?
2.1 称量误差:
检查天平是否平稳,天平周围是否有其他仪器干扰,是否有静电干扰
2.2 滴定剂浓度错误:
检查滴定液的计算和浓度、 摩尔反应系数(每摩尔盐酸含 2 摩尔 H+、每摩尔硫酸含 2 摩尔 H+)、滴定剂系数;对滴定酸进行标定,重新计算
2.3 样品或标准品污染:
重新取样,或更换标准品
2.4 样品中的氮含量较高:
减少样品量,样品中氮含量不可超过 200mg
2.5 样品转移过程损失:
避免天平转移到样品管过程中,样品损失,或挂壁
2.6 玻璃器皿污染:
清洗玻璃器皿
2.7 消解硫酸不足:
增加硫酸用量(依据经验,一般常量法比如 1g 左右样品试用 20mL 浓硫酸,半微量法使用 10 mL 浓硫酸)
2.8 消化时发生泄漏:
检查抽吸模块密封性
2.9 消解时发生喷溅:
调整加热档,使消解仪缓慢升温,避免样品因喷溅造成损失
2.10 催化剂与硫酸比例不对:
纠正催化剂与浓硫酸的使用比例在 1:3—1:2
2.11 消解未完成:
延长消解时间,保证样品澄清后继续消解 30 分钟
2.12 消解后未完全冷却:
消解后冷却至少 30 分钟
2.13 NaOH 加入量不足或所用的 NaOH 浓度不正确 (应为 32 %):
纠正用量,直到可以观察到在碱加入后样品颜色发生变化
2.14 蒸馏时发生泄漏:
进行蒸汽力度测试
2.15 滴定剂浓度错误:
检查滴定液的计算和浓度、 摩尔反应系数、滴定剂系数;对滴定酸进行标定,重新计算
2.16 pH 电极故障:
使用标准溶液校准电极,必要时进行更换,如使用标准缓冲盐进行校准多次仍不能通过滴定仪要求则建议更换
2.17 手工滴定指示剂变性:
重新配置母液
2.18 计算错误:
重新计算,更换实验员对实验结果核对
问
测定的氮含量重复性不佳可能是哪些原因?该如何纠正?
3.1 称量误差:
检查天平是否平稳,天平周围是否有其他仪器干扰,是否有静电干扰
3.2 样品非均质:
由于样品的不均质导致结果不平行,请重新均质样品
3.3 样品或标准品污染:
重新取样,或更换标准品
3.4 样品转移过程损失:
避免天平转移到样品管过程中,样品损失,或挂壁
3.5 玻璃器皿污染:
清洗玻璃器皿
3.6 消解时发生喷溅:
调整加热档,使消解仪缓慢升温,避免样品因喷溅造成损失
3.7 消化时发生泄漏:
检查抽吸模块密封性
3.8 尾气吸收抽吸力不足:
检查尾气吸收仪管路密封性,定期清洗尾气吸收仪的泵
3.9 消解期间抽吸力太强:
使用旁路阀降低尾气吸收装置的抽吸力
3.10 消解未完成,消解时间太短:
延长消解时间,保证样品澄清后继续消解 30 分钟
3.11 蒸馏时发生泄漏:
进行蒸汽力度测试
3.12 蒸馏和滴定时搅拌器不工作:
清洗搅拌器,必要时进行更换
3.13 滴定系统、滴定管、样品管中有气泡:
检查滴定酸液位,如滴定酸不足及时补充,并在滴定系统上进行排液操作
3.14 pH 电极校准不正确或未校准:
使用标准溶液校准电极,必要时进行更换,如使用标准缓冲盐进行校准多次仍不能通过滴定仪要求则建议更换
3.15 滴定管被堵塞、松脱、太短或损坏:
检查滴定管,清洁或重新连接
3.16 手工滴定指示剂变性:
重新配置母液
来源于:瑞士步琦有限公司 BUCHI Labortechnik AG
热门评论
最新资讯
厂商动态
新闻专题
更多推荐