方案摘要
方案下载应用领域 | 制药/生物制药 |
检测样本 | 化药制剂 |
检测项目 | |
参考标准 | 2020版药典 |
利用双三元在线除盐技术,在保留原一维不挥发性流动相的基 础上,对样品中的主化合物及杂质进行分离,达到较好的分离 度,结合二维色谱柱切换技术实现在线脱盐,二维采用质谱兼 容性流动相,将收集环中馏分脱盐后转入质谱,通过去卷积软 件处理采集数据,可以了解寡肽样品电荷分布范围及其分子 量。该方法重现性良好,自动化程度高,值得推广
寡肽一般指由2-20个氨基酸残基通过肽键连接形成的生物活性肽,通常也被称作小肽,低聚肽或者小分子活性肽[1]。相较 于小分子药物,寡肽药物具有更好的靶向性,而对于蛋白质和 多肽,寡肽分子量更小,结构更简单更容易被人体吸收[2,3]。 目前,肽类合成主要是通过固相肽合成技术,合成过程中难免会形成相关杂质,包括氨基酸丢失,插入或错配,有关同分异构体,以及脱氨基、氧化或还原等降解杂质[4]。液相质谱联用 (LC-MS)技术作为现代常见的有机化合物定性手段,已被广泛用于合成路线中主化合物及有关杂质鉴定, Zhirui Lian等人[5]总 结了质谱用于合成肽杂质分析的优势,阐述了LC-MS可以用于合成肽的定性及定量分析。质谱使用者都了解,不挥发性盐不能直接进入质谱,而某些不挥发性盐流动相如磷酸盐体系,有特定的缓冲区间,对于一些难分离的化合物可以提升分离度。 为了解决上述问题,二维在线除盐技术日趋流行。刘珊[6]等人 采用柱切换在线除盐DGLC-MS 联用鉴定克林霉素磷酸酯中杂质,体现了二维液相质谱前端除盐技术的便捷性及可靠性。本文借助二维液相色谱实现在线除盐,结合变色龙软件去卷积功能,对合成寡肽工艺中出现的杂质进行定性,研究其电荷分布及分子量
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