采用安捷伦 7000 系列三重串联四极杆串联质谱 GC/MS/MS 系统分析豆奶中八种植物雌激素

2018/07/22   下载量： 3 次

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应用领域 食品/农产品
检测样本 豆制品
检测项目 营养成分>雌激素类
参考标准 暂无

本文应用安捷伦 7000 系列气相色谱串联质谱 (GC/MS/MS) 建立了豆奶中八种植物雌激素（包括鹰嘴豆芽素 A (biochanin A)，香豆雌酚 (coumestrol)，大豆黄酮 (daidzein)，雌马酚 (equol)，芒柄花素 (formononetin)，染料木黄酮 (genistein)，大豆黄素 (glycitein) 和樱黄素 (prunetin)）的分析方法。用乙酸乙酯液液萃取法提取豆奶中植物雌激素，用三甲基氯硅烷 (TMCS) 和 N, O-双（三甲硅基）三氟乙酰胺 (BSTFA) 将分析物衍生成相应的醚，通过在不同裂解电压下形成的子离子和母离子推断各植物雌激素的裂解模式，得到各分析物相应的质谱图。由质谱裂解结果可知，各植物雌激素典型的裂解模式是失去甲基和羰基。每种分析物选择两个特征碎片离子进行鉴定、确认和定量分析。本方法适用于豆奶中植物雌激素的鉴定、确认和定量分析，且校准曲线的范围可达三个数量级。

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本文应用安捷伦 7000 系列气相色谱串联质谱 (GC/MS/MS) 建立了豆奶中八种植物雌激素（包括鹰嘴豆芽素 A (biochanin A)，香豆雌酚 (coumestrol)，大豆黄酮 (daidzein)，雌马酚 (equol)，芒柄花素 (formononetin)，染料木黄酮 (genistein)，大豆黄素 (glycitein) 和樱黄素 (prunetin)）的分析方法。用乙酸乙酯液液萃取法提取豆奶中植物雌激素，用三甲基氯硅烷 (TMCS) 和 N, O-双（三甲硅基）三氟乙酰胺 (BSTFA) 将分析物衍生成相应的醚，通过在不同裂解电压下形成的子离子和母离子推断各植物雌激素的裂解模式，得到各分析物相应的质谱图。由质谱裂解结果可知，各植物雌激素典型的裂解模式是失去甲基和羰基。每种分析物选择两个特征碎片离子进行鉴定、确认和定量分析。本方法适用于豆奶中植物雌激素的鉴定、确认和定量分析，且校准曲线的范围可达三个数量级。

引言

植物雌激素是天然存在于多种植物中的一组非类固醇多酚化合物，它通过与雌激素受体结合诱导生物学反应。通常它们在豆科植物中的含量很高，例如大豆，三叶草，紫花苜蓿，黄豆和豌豆。类黄酮化合物（由2-苯基-1，4-苯并吡喃酮衍生而来的水溶性植物色素）对人类的有益影响曾有报道，而且它们有清除自由基的作用。然而，伴随着废水中的合成激素和人类雌激素的排放，植物雌激素也被认为是潜在的鱼类内分泌干扰物[3]。此外，在经常进食（每周进食两次以上）大豆食品的北美男性中发现植物雌激素，尤其是大豆黄酮，染料木黄酮和大豆黄素会导致精子数量减低。因为植物雌激素的排放不仅来源于植物也来源于人类和牲畜的食物摄取，因此评估食品中植物雌激素的来源以及地表水和废水中植物雌激素浓度十分必要。我们小组在前期的研究中发现大豆加工厂的废水会引起地表水中含有一定浓度的大豆黄酮和染料木黄酮。

目前，已有几种定性和定量分析类黄酮化合物的方法，包括气相色谱法和液相色谱法。在豆奶这种复杂基质中，由于基质干扰作用，具有选择性的离子阱或串联质谱法（液相色谱串联二级

质谱或气相色谱串联二级质谱）成为了确认这些待测物的主要分析方法。总体来说气相色谱的相关检测方法对植物雌激素有很高的分离能力和低检测限，但是需要通过衍生化使其变为三甲基硅醚衍生物以增强其挥发性和改善热稳定性。二级质谱联用技术(MS/MS) 通过监测二个或三个特征碎片离子能够充分表征硅烷化植物雌激素，因此它比单一离子监测技术选择性高。

本文使用Agilent 7000 气相色谱三重串联四级杆质谱联用设备对豆奶中的八种植物雌激素进行鉴定和确认。通过每种分析物的特征碎片离子对各植物雌激素进行鉴定。

结论

本文建立了八种植物雌激素（鹰嘴豆芽素A，香豆雌酚，大豆黄酮，雌马酚，芒柄花素，染料木黄酮，大豆黄素和樱黄素）的三甲基硅烷衍生物的GC/MS/MS 分析鉴定方法。研究结果显示，安捷伦7000 系列三重串联四极杆串联质谱在分析豆奶样品中植物雌激素时稳定灵敏度高可靠性好。另外，通过在碰撞池中对母离子进行裂解研究了八种植物雌激素的裂解模式，结果表明，分析物典型的碎片丢失是失去甲基和羰基，为了定性定量准确，每种化合物选择两种碎片离子。本方法适用于豆奶中植物雌激素的鉴别和确认。

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安捷伦科技(中国)有限公司
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