方案摘要
方案下载应用领域 | 医疗/卫生 |
检测样本 | |
检测项目 | |
参考标准 | 暂无 |
法医和疼痛科实验室进行全血中丁丙诺啡和去甲丁丙诺啡的检测时,需要一种能在浓度低于 1 ng/mL 的水平内可靠检测这些化合物的分析方法。一种简单的样品净化步 骤,结合使用离子对 468.2&55.1 和 414.2&83.1 的 LC/MS/MS 方法,可实现两种分析物的检测限(LOD)低于 0.1 ng/mL。每种分析物校正曲线的线性范围为 0.2 到 20 ng/mL,其 R2 等于或大于 0.999。采用安捷伦新一代产品分析可获得更高的检测灵敏度。这些产品包括 Agilent Bond Elut Plexa PCX 混合模式聚合物 SPE 吸附剂、 Agilent Poroshell 120 EC-C18 2.7 µm 表面多孔填料 LC 柱、Agilent 1200 Infinity LC 系统、以及配备了安捷伦喷射流技术(AJST)增强型电喷雾离子源的 Agilent 6460 三重四极杆 LC/MS 系统。
丁丙诺啡是一种半合成的鸦片样药物,用于治疗慢性疼痛,以及作为美沙酮的替代品治疗阿片成瘾。作为镇痛剂,丁丙诺啡的效果大约是吗啡的25 到40 倍。丁丙诺啡的结构与吗啡相似,
但疏水性更强(见图1)。丁丙诺啡在肝脏中存在N-脱烷基化反应,产生其主要活性代谢物——去甲丁丙诺啡。丁丙诺啡和去甲丁丙诺啡在血液中的浓度非常相近,50% 以上病例中的浓度低于1 ng/mL(Selden 等,2011),给分析人员的检验带来了极大的挑战。此外,由于这些分析物分子结构稳定性强,碰撞诱导裂解产生的碎片量少,因此对这些化合物进行MS/MS 分析很困难。为了实现检测灵敏度低于1 ng/mL,检测这些化合物的分析方法不仅要有出色的MS 性能,还要有一个回收率高、离子抑制低的有效样品净化程序。我们使用SPE 处理的全血提取物洁净度高,较容易地实现了检测限低于0.1 ng/mL。与其它聚合物吸附剂不同,所有Agilent Bond Elut Plexa 系列产品的颗粒均具有不含氨基的羟基化表面,消除了对蛋白质的吸附,从而获得了最低的离子抑制和最高的检测灵敏度。又由于填料粒径分布窄且没有粉末造成堵塞,还实现了高流速和良好的重现性。
利用该方法可实现分析物的良好分离和极佳的峰形,这是采用Agilent Poroshell 120 系列色谱柱进行分析的特色。采用表面多孔的2.7 μm 填料,这些色谱柱具有与亚2 μm UHPLC 色谱柱相似的柱效,但背压却降低了约40%。这就允许用户甚至可以使用400 bar LC 系统来提高分离度,并且通过使用更高的流速来缩短分析和再平衡时间。
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