方案摘要
方案下载应用领域 | 食品/农产品 |
检测样本 | 葡萄酒及果酒 |
检测项目 | 营养成分>主成分含量测定 |
参考标准 | 迪马科技 |
迪马科技建立的《葡萄酒中白藜芦醇苷和白藜芦醇的测定》方案,无需样品提取过程,调节pH 后,直接使用ProElut BLC 白藜芦醇检测专用固相萃取柱进行净化,高效液相色谱法检测。可以为选择葡萄品种、改进酿造工艺、判断红酒真伪及质量等方面提供重要的参考。
1、适用范围
本方案适用于葡萄酒中顺反式白藜芦醇苷和顺反式白藜芦醇的检测。
2、标准品配制
(1) 标品
① 储备液:
反式白藜芦醇苷1000 μg/mL:溶剂为甲醇;
反式白藜芦醇1000 μg/mL:溶剂为甲醇。
② 混合标准溶液制备:
顺反式白藜芦醇苷混标:取1 mL反式白藜芦醇苷1000 μg/mL储备液于透明10 mL带盖玻璃管中,在254 nm和365 nm混合波长下避光照2 h,取40 μL用30%乙腈水稀释至1 mL,同时制备40 μg/mL反式白藜芦醇苷溶液,进行HPLC分析,采用外标法以峰面积进行计算,得反式白藜芦醇苷浓度295 μg/mL、即顺式白藜芦醇苷浓度705 μg/mL;
顺反式白藜芦醇混标:取1 mL反式白藜芦醇1000 μg/mL储备液于透明10 mL带盖玻璃管中,在254 nm和365 nm混合波长下避光照2 h,取40 μL用30%乙腈水稀释至1 mL,同时制备40 μg/mL反式白藜芦醇溶液,进行HPLC分析,采用外标法以峰面积进行计算,得反式白藜芦醇浓度405 μg/mL、即顺式白藜芦醇浓度595 μg/mL;
四种物质混合标准溶液:取等体积的顺反式白藜芦醇苷混标和顺反式白藜芦醇混标混匀,得到四种物质混标,浓度分别为:反式白藜芦醇苷浓度147.5 μg/mL、顺式白藜芦醇苷浓度352.5 μg/mL、反式白藜芦醇浓度202.5 μg/mL、顺式白藜芦醇浓度297.5 μg/mL;
(2) 加标方法:取四种物质混合标准溶液400 μL,加至5 mL样品中。
3、样品制备
取约50mL样品于100 mL烧杯中,用氨水调节样品pH至6.0,取出5 mL待净化(如需进行回收率测试,在此步骤加入混合标准品)。
4、净化——ProElut BLC 6 mL(Cat.# 65918)
a活 化: 依次加入5 mL甲醇、5 mL水,流出液弃去;
b上 样: 加入待净化液,流出液弃去;
c淋 洗: 加入5 mL 30%甲醇水,流出液弃去,推干小柱;
d洗 脱: 加入5 mL甲醇,收集流出液;
e重新溶解: 将流出液在55 ℃下氮吹至低于1 mL,用流动相定容至5 mL,供HPLC分析。
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