你是否还在为传统柱层析速度慢,不容易测量而烦恼?是否还在为填料装填不均匀、没填实而在淋洗过程中出现气泡而烦恼。那么你有没有想过尝试使用快速分离色谱柱(Flash柱)呢?Flash柱相比传统柱层析更加省时省力省溶剂,而且采用紫外检测器更容易判断目标产物。Flash柱正相使用的方法开发可以基于薄层色谱(TLC)点板结果,只需要下面简单两步即可实现!
01
TLC点板
选择极性和溶解性都较合适的展开剂,使得目标产物的Rf值(比移值=溶质移动的距离/溶液移动的距离)在0.15-0.4之间,同时保证各组分分离度(Rf≥0.1)。这是最难也是最关键的一步,通常使用一个由高极性和低极性溶剂组成的混合溶剂,高极性的溶剂还有增加区分度的作用,一般先采用高极性溶剂/低极性溶剂两种体积比为1/3的混合溶剂,如果有分离迹象,再调整比例(或者加入第三种溶剂),直到达到最佳效果。可参考下列溶剂极性顺序进行展开剂选择。
水(极性最大)>甲酰胺>乙腈>甲醇>乙醇>丙醇 > 丙酮>二氧六环>四氢呋喃>甲乙酮>正丁醇>乙酸乙酯>乙醚>异丙醚>二氯甲烷>氯仿>溴乙烷>苯>氯丙烷>甲苯>四氯化碳>二硫化碳>环己烷>己烷>庚烷>煤油(极性最小)
02
转换到Flash硅胶柱
确定薄层点板展开剂比例后,该怎么设定Flash分离方法呢,这里有个经典的方法,线性梯度法:
初始溶剂比例=薄层点板溶剂比例÷4
最终溶剂比例=薄层点板溶剂比例×2
第一部分:初始溶剂比例,走1个柱体积
第二部分:从初始溶剂比例线性增加至最终溶剂比例,走11个柱体积
第三部分:最终溶剂比例,走2个柱体积
过柱子时Rf值大的先出来,Rf值小的后出来!
小伙伴们还在犹豫什么,Flash柱用起来吧!
月旭新一代WelFlash® SiO2 LS正是您分离纯化的得力助手。新款中低压制备柱具有耐压高、柱效好、耐腐蚀等优点。每批制备柱的性能参数都经过精密的控制和严格的测试,以确保产品批间具有较高的回收率和较好的重现性。
WelFlash® SiO2 LS柱有以下规格可供选择:4g、12g、25g、40g、80g、120g、220g、330g。
产品特点如下:
01 采用优质硅胶装填,金属杂质含量低、均匀的粒径分布和孔径分布、机械强度高,性价比优越。
02 优化装填工艺,分离度高,重现性好
03 聚丙烯柱管和接头采用新型技术设计,最高耐压200psi,适用于大多数快速色谱仪。
产品规格及货号:
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