分光光度计检测几种中草药总黄酮含量

2016/03/29   下载量: 4

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应用领域 制药/生物制药
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参考标准 分光光度计

紫外分光光度法检测总黄酮的含量是现在应用最为广泛的检测方法,本文以几种中草药为样品,使用UV1900紫外可见分光光度计(南京科捷分析仪器有限公司)对其中所含有的黄酮进行分析。

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    黄酮类化合物是指以黄酮为母体的一大类化合物,广泛分布于蔬菜、水果、牧草、和药用植物中,是许多中草药的有效成份。生物总黄酮是指黄酮类化合物,是一大类天然产物,广泛存在于植物界,是许多中草药的有效成分。在自然界中最常见的是黄酮和黄酮醇,其它包括双氢黄(醇)、异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷及新黄酮类等。

    天然黄酮类化合物多以苷类形式存在  ,并且由于糖的种类、数量、联接位置及联接方式不同可以组成各种各样黄酮苷类。组成黄酮苷的糖类包括单糖、双糖、三糖和酰化糖。黄酮苷固体为无定形粉末,其余黄酮类化合物多为结晶性固体。清除自由基、保护DNA、抗氧化作用、对造血系统和免疫系统具有保护作用。

     黄酮广泛存在自然界的某些植物和浆果中,平时我们可以通过多食葡萄、洋葱、花椰莱、喝红酒、多饮绿茶等方式来获得黄酮,作为身体的一种补充。二十年前,科学家发现具有活化石之称的银杏树中含有相对较多的黄酮,主要从银杏叶中提取黄酮。

     紫外分光光度法检测总黄酮的含量是现在应用最为广泛的检测方法,本文以几种中草药为样品,使用UV1900紫外可见分光光度计(南京科捷分析仪器有限公司)对其中所含有的黄酮进行分析。

    UV1900紫外可见分光光度计采用全新设计的比例监测双光束学系统,具有优良的光学性能,使用方便,是实验室分析必备的基本仪器之一。全新设计的比例监测双光束光学系统,具有了优良的光学性能,高性能的全息闪耀光栅,确保了仪器的低杂散光。

    样品处理

    1.  艾纳香又称大风艾、大艾、冰片艾等,属菊科多年生木质草本植物,叶和嫩枝及根均可药用,性味温辛,具有清热利尿祛风消肿、温中活血、消炎镇痛、补虚壮阳之功效。可用于治疗寒湿泻痢、腹痛肠鸣、跌打刀伤和高血压等症。

     准确称取艾纳香药材粉末2g,至烧瓶中,加甲醇100mL,冷浸30min后,在水浴上加热回流60min,分取滤液,药渣加甲醇100mL,继续水浴加热回流30min,过滤,药渣用30mL甲醇洗涤,合并滤液,滤液置250mL量瓶中,放冷,加甲醇至刻度,摇匀,待测。

    2.  准确称取干燥的蕨类样品粉末3g(用滤纸包裹捆扎)于索氏提取装置中,加70%的乙醇50mL,回流提取2h,取出提取液后用85%的乙醇溶液定容至50mL。吸取4mL提取液于盛有200mg层吸硅胶粉的小烧杯内摇匀,转移至600mg的硅胶层析柱,分别用70%、80%、90%和无水乙醇溶液依次洗脱,收集洗脱液,用85%的乙醇溶液定容至50mL,待测。

    3. 黑骨藤,属于萝藦科杠柳亚科植物,具有祛风除湿、活血通络、消痹止痛的功能。

     精密称取一定量黑骨藤茎,粉碎过30目筛,按1:20的固液比用50%乙醇浸泡后超声提取,提取条件:时间30min,温度70℃,超声频率40KHz。提取液经过滤、浓缩、定量后,待测。

    4.  杏香兔耳风又名金边兔耳草,菊科植物,具有清热补虚、凉血止血、利湿解毒的功效,广泛用于治疗感冒咳嗽、咽喉疼痛、肠炎痢疾、泌尿疾病、风湿痹痛、跌打损伤、活血止痛等。

     将杏香兔耳风于80℃干燥5h,粉碎过80目筛,精密称取5.000g样品,置于三角瓶中,加入50mL石油醚(镏程60~90℃),于70℃下水浴回流10h,除去样品中的脂肪,抽滤后挥干石油醚,滤渣置于三角瓶中,加入50mL蒸馏水,水浴回流2次,每次2h,然后静置,过滤,用蒸馏水冲洗,滤液定容至100mL。

    样品检测

     精密量取供试品溶液2mL,置25mL量瓶中,分别加入5%亚硝酸钠溶液1mL,10%硝酸铝溶液1mL,4%氢氧化钠溶液10mL,加水至刻度,放置15~20min左右显色后,于510nm波长处测定吸收值。

    结果计算

    将所测吸光值代入标准曲线方程即可计算出总黄酮含量。


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