方案摘要
方案下载应用领域 | 农/林/牧/渔 |
检测样本 | 饲料 |
检测项目 | 营养成分>维生素 |
参考标准 | 暂无 |
叶酸也叫维生素B9,是一种水溶性维生素。《饲料添加剂 叶酸(GB/T 7302-2008)》规定了饲料添加剂叶酸的要求、试验方法、检验规则及标签、包装、运输、贮存等。适用于化学合成法制得的叶酸产品,在饲料工业中作为维生素类饲料添加剂。实验用碳酸钠溶液提取饲料中的叶酸,提取液经阴离子交换固定萃取小柱净化富集后,注入反相高效液相色谱仪反相色谱系统中进行分离,用紫外检测器检测。
饲料是所有人饲养的动物的食物的总称,比较狭义地一般饲料主要指的是农业或牧业饲养的动物的食物。包括大豆、豆粕、玉米、鱼粉、氨基酸、杂粕、添加剂、乳清粉、油脂、肉骨粉、谷物、甜高粱等十余个品种的饲料原料。按原料不同,可分为粗饲料、青绿饲料、青贮饲料、能量饲料、蛋白质补充料、矿物质饲料、维生素饲料、添加剂等。
叶酸也叫维生素B9,是一种水溶性维生素。《饲料添加剂 叶酸(GB/T 7302-2008)》规定了饲料添加剂叶酸的要求、试验方法、检验规则及标签、包装、运输、贮存等。适用于化学合成法制得的叶酸产品,在饲料工业中作为维生素类饲料添加剂。实验用碳酸钠溶液提取饲料中的叶酸,提取液经阴离子交换固定萃取小柱净化富集后,注入反相高效液相色谱仪反相色谱系统中进行分离,用紫外检测器检测。
实验仪器
高效液相色谱仪(南京科捷分析仪器有限公司),紫外检测器(或二极管阵列紫外可见光检测器),离心机,固相萃取装置等。
样品准备:
1.提取 准确称取试样适量,配合饲料及浓缩饲料2.5 g,添加剂预混合饲料1 g,至50 mL离心管中,加入5 mL(预混合饲料8 mL)0.1mol/L EDTA溶液,涡旋混合2min,加入25mL甲醇,涡旋混合2min,全部移至50mL容量瓶中,再加入10mL 1mol/L碳酸钠溶液,用水定容至50mL,超声提取15min后,取20mL样液于50mL离心管中,10000rpm离心10min。准确移取上清液10mL,于15mL离心管中,在40℃下氮吹至约6.5mL。
2.净化 固相萃取柱先用5mL甲醇活化,再用5mL水进行平衡后,移取全部6.5mL备用液过柱。取5mL水冲洗盛放上清液的离心管,充分转移至萃取柱中淋洗,再用5mL甲醇淋洗,抽干5min,用6mL洗脱液每次2mL分3次洗脱,流速控制在1ml/min,收集洗脱液。洗脱液在40℃下氮吹至1.0mL以下,向残余物中加水至1.0mL,超声2min,混匀后过0.22μm滤膜,进样检测。
色谱条件(参考):
色谱柱 | C18柱(100mm×4.6mm,2.7μm) | ||
柱温 | 35℃ | ||
检测器 | 紫外检测器 | ||
检测波长 | 280nm | ||
流速 | 1.0ml/min | ||
进样量 | 10μL | ||
流动相 | A:0.05mol/L磷酸二氢钠(pH=6.30) B:甲醇 | ||
梯度洗脱程序 | 时间 | A,% | B,% |
0 | 92 | 8 | |
6 | 92 | 8 | |
8 | 8 | 92 | |
11 | 8 | 92 | |
11.1 | 92 | 8 | |
14 | 92 | 8 |
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