第三期
关于液相色谱柱使用中的常见问题解答(二)
上一期的十问十答液相柱篇主要给大家总结了最常见液相柱使用中的问题与解答。
本期小编继续为大家讲解的是关于特殊色谱柱使用上的常见问题。
Q1、ShimNex HE SAX/SCX以及WP SAX/SCX色谱柱怎么活化?
1. 需要使用至少20倍柱体积的流动相平衡色谱柱。
2. 当流动相中缓冲盐浓度较高时候,为了防止盐在色谱柱或系统中析出,可使用20%的乙腈水溶液冲洗5倍以上柱体积作为缓冲,再过渡到流动相。
3. 因为SCX色谱柱键合的基团是磺酸基团,容易与醇类物质发生酯化反应,所以流动相应当避免醇的使用。
Q2. ShimNex HE CN 色谱柱的活化?
氰基柱既可以用在正相模式,又可以用于反相模式。考虑到色谱柱寿命,推荐使用过程中固定为其中一种模式。
因色谱柱出厂时使用庚烷:乙酸乙酯=90:10进行质控,所以如需要使用反相模式,请先使用异丙醇等将柱内的溶剂进行充分置换后再用相应的流动相进行活化操作。
Q3. C4 色谱柱怎么活化?
一般C4色谱柱的活化参照C18色谱柱,首次使用色谱柱前,应先用20倍柱体积以上的甲醇/乙腈充分活化。
为确保数据的质量,分析前应使用至少 10 倍柱体积的流动相平衡色谱柱。
若流动相中缓冲盐浓度较高, 为了防止盐在色谱柱或系统中析出,应先使用与流动相构成比例相同或有机相比例较低的水溶液冲洗至少 5 倍柱体积,再过渡到流动相。
Q4. ShimNex HE SAX/SCX以及WP SAX/SCX怎么冲洗?
硅胶基质的离子交换色谱柱一般流失比较严重,寿命一般不是很好。所以色谱柱的清洗维护非常重要。
色谱柱的污染可能会导致峰形的变化、峰分裂、肩峰、柱效的变化或背压增加等问题。请参考以下方法进行清洗:
Q5. 硅胶基质色谱柱的保存 有什么注意事项?
Q6. 氨基酸分析仪中,使用的Amino Na/Li型色谱柱,色谱柱怎么活化?
在使用长期停止使用的色谱柱之前,用0.2M氢氧化钠水溶液冲洗数小时。
Q7. 氨基酸分析仪中,使用的Shim-pack Amino Na/Li型色谱柱,色谱柱脏了的时候怎么冲洗?
Q8. 使用的Amino Na/Li型色谱柱,色谱柱怎么保存?
如果色谱柱超过半年不使用,建议使用以下流动相冲洗保存:
使用0.2M的氢氧化钠(氢氧化锂)水溶液清洗色谱柱,用0.01%的辛酸的10%乙醇溶液置换色谱柱,最后将色谱柱保存在阴暗地方。
Q9. Shim-pack Amino系列色谱柱有什么注意事项?
有机相比例不高于10%,避免高温停泵(0.1-0.3 ml/min降至室温后再停泵)。
Q10. Shim-pack Amino Na型和Li型色谱柱有什么区别?
Shim-pack Amino-Na:大概可分析19个化合物,一针分析时间为90分钟,分析速度快,化合物少;
Shim-pack Amino-Li:大概可分析38个化合物,一针分析时间为180分钟,分析速度慢,化合物多。
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