SepaBean machine快速制备液相色谱系统应用于脂质体类化合物分离纯化应用案例检测仪器_检测方案

方案摘要

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应用领域	制药/生物制药
检测样本	原料药
检测项目
参考标准	/

脂质体（liposome）是一种人工膜，是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心)，具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同。脂质体具有靶向性和淋巴定向性、缓释作用、降低药物毒性以及提高稳定性等特点，使脂质体具有广泛的应用。主要应用于转基因、药物递送，还可用作将染料递送至纺织品、杀虫剂至植物、酶和营养补充剂至食物以及化妆品至皮肤的载体等，具有广阔的应用领域。本案例中主要以来自某生物医药公司的脂质体样品为例，对其分离纯化方法进行简单的介绍。

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配置单

SepaBean machine T快速液相制备色谱
型号：SepaBean machine T-经济型

¥10万 - 20万
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键合相系列 SepaFlash快速液相制备色谱柱
型号：

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方案详情

SepaBean machine快速制备液相色谱系统

应用于脂质体类化合物分离纯化应用案例

脂质体（liposome）是一种人工膜，是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心)，具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同。脂质体具有靶向性和淋巴定向性、缓释作用、降低药物毒性以及提高稳定性等特点，使脂质体具有广泛的应用。主要应用于转基因、药物递送，还可用作将染料递送至纺织品、杀虫剂至植物、酶和营养补充剂至食物以及化妆品至皮肤的载体等，具有广阔的应用领域。本案例中主要以来自某生物医药公司的脂质体样品为例，对其分离纯化方法进行简单的介绍。

样品信息

来自某生物医药公司脂质体，样品呈白色粉末状，纯度98%，想要提高纯度至99.5%，溶解性较差，采用二氯甲烷加甲醇进行超声加热溶解（温度低于60度），且样品紫外吸收较弱，需要连接ELSD进行检测，因此采用SepaBean machine快速液相制备色谱系统搭配ELSD检测器进行分离纯化。

实验方案

先采用HPLC液相检测，根据其液相谱图确认进一步分离纯化方法，液相谱图结果为目标产物为 RT=12.918的峰，纯度98.4%，详情如图1所示。

图1.HPLC液相谱图

根据液相方法及结果进行进一步分离纯化的实验参数设置如表1所示。

表1. Flash制备实验参数

SepaBean machine标准型 + ELSD
分离柱	120g SepaFlash键合相C18(40-63 µm, 100 &angst;, 订货号：SW-8201-120-IR)
检测波长	220 nm；254 nm；ELSD
流动相	溶剂A：水溶剂B：甲醇
流速	40ml/min
进样量	110mg
洗脱梯度	时间 (min)	溶剂B (%)
	0	70
	20	90
	35	100
	50	100

结果与讨论

该脂质体类样品由于其溶解性很差，因此降低上样量，上样量110mg，采用120g C18分离柱（40-63 µm, 100 &angst;, 订货号：SW-8201-120-IR）进行分离纯化。从分离谱图可以看出，该物质紫外吸收较弱需要借助ELSD检测器进行检测，从分离谱图看其分离效果较好，目标组分满足客户检测纯度要求。此次解决方案采用的是三泰科技的键合相系列色谱柱，仪器是SepaBean machine标准型制备液相色谱系统搭配ELSD检测器，为紫外吸收较弱的脂质体类化合物提供更多的分离纯化方案，同时也为其他种类紫外吸收较弱的化合物的分离纯化提供参考。

SepaFlash键合相系列分离柱订购信息

无定形C18，粒径40–63µm，孔径60&angst;

（碳含量17%，封端，比表面积500m2/g，上样量0.1–2%）

产品编码	柱尺寸	上样量	流速(ml/min)	柱长度(mm)	柱内径(mm)	最大工作压力(psi/bar)
SW-8201-004-IR	5.9 g	5.9 mg–118 mg	10–20	113.8	12.4	400/27.5
SW-8201-012-IR	23 g	23mg–0.46g	15–30	134.8	21.4	400/27.5
SW-8201-025-IR	38 g	38 mg–0.76 g	15–30	184	21.4	400/27.5
SW-8201-040-IR	55 g	55 mg–1.1 g	20–40	184.4	26.7	400/27.5
SW-8201-080-IR	122 g	122 mg–2.5 g	30–60	257.4	31.2	350/24.0
SW-8201-120-IR	180 g	180 mg–3.6 g	40–80	261.5	38.6	300/20.7
SW-8201-220-IR	340 g	340 mg–6.8 g	50–100	223.5	61.4	300/20.7
SW-8201-330-IR	475 g	475 mg–9.5 g	50–100	280.2	61.4	250/17.2

※ 兼容市场上所有快速液相制备色谱系统。

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文献贡献者

常州三泰科技有限公司

白金会员丨第6年

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