ELISA试剂盒在试验遇到的一些问题和解决办法

上海酶联生物科技有限公司

ELISA试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在试验上得到了广泛的使用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不留意，有或许导致显色不全、花板等成果。下面谈谈操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法。

一选择ELISA试剂盒：

选择质量的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。

二加样或许原因：

1）加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外。

2）血清或血浆标本别离欠好即进行加样。

3）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)。

解决办法：

1）标本为血清：将血液先天然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：有必要运用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后有必要立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。

2)加样后及时放入孵箱。

3)标本较多时，请分批操作。

4)假如选用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。

三ELISA试剂盒孵育或许原因：

1)孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反响孔周围，难以清洗完全。

2)孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸腾，吸附于孔壁，难于清洗完全。

解决办法：

1)贴封片或加盖；

2)按说明过程严格控制操作时间。

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