在人elisa试剂盒批发中一般有3次加样步聚，即加标本，ELISA试剂盒加酶结合物，加底物。冻结血清融解后，蛋白质部分浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，防止气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上激烈振动。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只需待血清天然凝固后即可取得。也可在板孔中加入稀释液，再在其加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以确保混和。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超越一周测定的需低温冰存。可用作ELISA测定的标本非常广泛，体液（如血清 ）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液、粪便）等均可作标本以测定其间某种抗体 或抗原成份，ELISA试剂盒中本次实验不需用的部分应及时放回冰箱保留。
ELISA试剂盒的操作因固相载体的构成不同而有所差异，国内医学检修一般均用板式点。除特殊情况外，在医学检修中均以血清作为检测标本。加酶结合物应用液和底物用液时可用定量多道加液器，使加液进程迅速完结。如有细菌污染，ELISA试剂盒菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。每次加标本应更换吸嘴，以发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。的试剂，良好的仪器和精确的操作是确保ELISA试剂盒结果正确牢靠的必要条件。
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