原代培育也称初代培育,严格地说即从体内取出安排接种培育到次传代阶段,但实际上,通常把代至第十代以内的培育细胞统称为原代细胞培育。一般继续1一4周。此期细胞呈活泼的移动,可见细胞分裂,但不旺盛。
初代培育细胞与体内原安排在形状结构和功能活动上相似性大。细胞群是异质的,也即各细胞的遗传性状互不相同,细胞相互依存性强。如把这种细胞群稀释分散成单细胞,在软琼脂培育基中进行培育时,细胞克隆形成率很低,即细胞独立生存性差。
最常用的原代培育有安排块培育和分散细胞培育。
1、安排块培育是将剪碎的安排块直接移植在培育瓶壁上,加入培育基后进行培育。
2、分散细胞培育则是将安排块用机械法或化学法使细胞分散。如欲从胎儿或新生儿的安排分离到活性最好的游离细胞,经典的办法是用蛋白水解酶消化细胞间的结合物,或用金属离子螯合剂除掉细胞相互粘着所依靠的Ca2+,再经机械轻度振动,使之成为单细胞。
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