上海酶联生物教您如何正确操作Elisa试剂盒！

上海酶联生物科技有限公司

你知道怎样操作Elisa试剂盒吗？

Elisa试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用，然而实验新手们面对各种各样、动则上千种的Elisa试剂盒，内心应该是崩溃的。

Elisa试剂盒的操作步骤：

(一)样品准备

1. 取动物全血按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品1周内可于2～8℃保存，长期需置-20℃保存。

2. 用样品稀释液将待检血清按100倍稀释(如2μl血清加入198μl样品稀释液中，混匀)。阴、阳性对照不用稀释。

3. 浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解，然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。

(二)检验方法

1. 使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。

2. 取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。

3. 空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。

4. 混匀，置37℃反应30分钟。

5. 扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。

6. 每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。

7. 洗涤，同步骤5。

8. 每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。

9. Elisa试剂盒每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。

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