昆虫超氧化物歧化酶（SOD）ELISA试剂盒操作方法

昆虫超氧化物歧化酶（SOD）酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
14U/L - 500 U/L
使用目的：
本试剂盒用于测定昆虫样本中超氧化物歧化酶（SOD）活性。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫超氧化物歧化酶（SOD）水平。用纯化的昆
虫超氧化物歧化酶（SOD）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入
超氧化物歧化酶（SOD），再与HRP 标记的超氧化物歧化酶（SOD）抗体结合，昆虫超氧化物歧化酶（SOD）ELISA试剂盒形成抗体-
抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成
蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的超氧化物歧化酶（SOD）
呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），昆虫超氧化物歧化酶（SOD）ELISA试剂盒通过标准曲线计算样品中昆虫
超氧化物歧化酶（SOD）活性浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（1000 U/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
500U/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
250U/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
125U/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
62.5U/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
31.25U/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，昆虫超氧化物歧化酶（SOD）ELISA试剂盒每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此
重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计
算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，昆虫超氧化物歧化酶（SOD）ELISA试剂盒试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月

GS-E20404     小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA试剂盒     Mouse von Willebrand Factor,vWF ELISA试剂盒    

GS-E20405     小鼠前心钠肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒     Mouse Pro Atrial Natriuretic Peptide,Pro-ANP ELISA试剂盒    

GS-E20406     小鼠N端前脑钠素(NT-proBNP)ELISA试剂盒     Mouse N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP ELISA试剂盒    

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GS-E20411     小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒     Mouse cardiac troponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA试剂盒    

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GS-E20413     小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒     mouse Beta-Endorphin,β-EP ELISA试剂盒    

GS-E20414     小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒     Mouse Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA试剂盒    

GS-E20415     小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA试剂盒     Mouse protein kinase B,PKB ELISA试剂盒    

GS-E20416     小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA试剂盒     Mouse secretory immunoglobulin A,sIgA ELISA试剂盒    

GS-E20417     小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒     Mouse heme oxygenase 2,HO-2 ELISA试剂盒    

GS-E20418     小鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒     Mouse Crosslaps,Cr ELISA试剂盒    

GS-E20419     小鼠促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒     mouse follicle-stimulating hormone,FSH ELISA试剂盒    

GS-E20420     小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒     Mouse cross-linked C-telopeptides of Type Ⅰ collagen,CⅠCP ELISA试剂盒    

GS-E20421     小鼠脱氧吡啶酚/脱氧吡啶啉(DPD)ELISA试剂盒     Mouse deoxypyridinoline,DPD ELISA试剂盒    

GS-E20422     小鼠吡啶交联物(PY)ELISA试剂盒     Mouse pyridinium crosslink/PyriLinks,PY ELISA试剂盒    

GS-E20423     小鼠骨桥素(OPN)ELISA试剂盒     Mouse Osteopontin,OPN ELISA试剂盒    

GS-E20424     小鼠促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒     mouse adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA试剂盒    

GS-E20425     小鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒     Mouse Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA试剂盒    

GS-E20426     小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒     Mouse transferrin receptor,TFR ELISA试剂盒    

GS-E20427     小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒     Mouse Cystatin C,Cys-C ELISA试剂盒    

GS-E20428     小鼠第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒     Mouse Factor Ⅷ-related Antigen,FⅧAg ELISA试剂盒    

GS-E20429     小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒     Mouse Pyruvate Kinase,M2-PK ELISA试剂盒    

GS-E20430     小鼠催乳素(PRL)ELISA试剂盒     mouse prolactin,PRL ELISA试剂盒    

GS-E20431     小鼠抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒     Mouse Resistin ELISA试剂盒    

GS-E20432     小鼠乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒     Mouse acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA试剂盒    

GS-E20433     小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒     Mouse Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA试剂盒    

GS-E20434     小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒     Mouse Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA试剂盒    

GS-E20435     小鼠5羟色胺(5-HT)ELISA试剂盒     Mouse 5-Hydroxytryptamine,5HT ELISA试剂盒    

GS-E20436     小鼠P物质受体(SP-R)ELISA试剂盒     Mouse substance P receptor,SP-R ELISA试剂盒    

GS-E20437     小鼠P物质(SP)ELISA试剂盒     Mouse Substance P,SP ELISA试剂盒    

GS-E20438     小鼠血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒     Mouse Vasoactive Intestinal Peptide,VIP ELISA试剂盒    

GS-E20439     小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒     Mouse Thyroid-Peroxidase,TPO ELISA试剂盒    

GS-E20440     小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA试剂盒     Mouse alpha-L-fucosidase,AFU ELISA试剂盒    

GS-E20441     小鼠血管舒缓激肽(BK)ELISA试剂盒     Mouse bradykinin,BK ELISA试剂盒    

GS-E20442     小鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒     Mouse Proinsulin,PI ELISA试剂盒    

GS-E20443     小鼠抗IgE受体抗体ELISA试剂盒     Mouse anti-IgE receptor antibody ELISA试剂盒