昆虫谷胱甘肽S转移酶（GST）ELISA试剂盒操作方法

昆虫谷胱甘肽S转移酶（GST）酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T
0.8?U/L -35?U/L
使用目的：
本试剂盒用于测定昆虫样本中谷胱甘肽S 转移酶（GST）活性。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫谷胱甘肽S 转移酶（GST）水平。用纯化的
昆虫谷胱甘肽S 转移酶（GST）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次
加入谷胱甘肽S 转移酶（GST），昆虫谷胱甘肽S转移酶（GST）ELISA试剂盒再与HRP 标记的谷胱甘肽S 转移酶（GST）抗体结合，形
成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化
下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽S 转
移酶（GST）呈正相关。昆虫谷胱甘肽S转移酶（GST）ELISA试剂盒用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计
算样品中昆虫谷胱甘肽S 转移酶（GST）活性浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶
2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品（64?U/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶
4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份
5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张
6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，昆虫谷胱甘肽S转移酶（GST）ELISA试剂盒提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
32?U/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液
16?U/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液
8?U/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液
4?U/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2?U/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
4. 配液：将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此
重复5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
10 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止
液后15 分钟以内进行。
操作程序总结：
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。
注意事项
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。昆虫谷胱甘肽S转移酶（GST）ELISA试剂盒如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计
算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月

GS-E20368     小鼠补体片断3a(C3a)ELISA试剂盒     Mouse Complement fragment 3a,C3a ELISA试剂盒    

GS-E20369     小鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒     Mouse 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA试剂盒    

GS-E20370     小鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒     Mouse Follistatin,FS ELISA试剂盒    

GS-E20371     小鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA试剂盒     Mouse Histone Deacetylase,HD ELISA试剂盒    

GS-E20372     小鼠雌三醇(E3)ELISA试剂盒     Mouse Estriol,E3 ELISA试剂盒    

GS-E20373     小鼠雄烯二酮(ASD)ELISA试剂盒     Mouse Androstenedione,ASD ELISA试剂盒    

GS-E20374     小鼠游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒     Mouse Free Testoterone,F-TESTO ELISA试剂盒    

GS-E20375     小鼠睾酮(T)ELISA试剂盒     Mouse Testoterone,T ELISA试剂盒    

GS-E20376     小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA试剂盒      Mouse Progesterone,PROG ELISA试剂盒    

GS-E20377     小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒     Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA试剂盒    

GS-E20378     小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒     Mouse Calcitonin,CT ELISA试剂盒    

GS-E20379     小鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA试剂盒     Mouse Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA试剂盒    

GS-E20380     小鼠内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒     Mouse Endothelin 1,ET-1 ELISA试剂盒    

GS-E20381     小鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒     Mouse Estradiol,E2 ELISA试剂盒    

GS-E20382     小鼠皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒     Mouse Cortisol ELISA试剂盒    

GS-E20383     小鼠促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒     Mouse Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA试剂盒    

GS-E20384     小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒     Mouse Methylase ELISA试剂盒 　    

GS-E20385     小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒     Mouse proliferating cell nuclear antigen antibody,PCNA ELISA试剂盒    

GS-E20386     小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒     Mouse lipoprotein lipase,LPL ELISA试剂盒    

GS-E20387     小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA试剂盒     Mouse tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRACP-5b ELISA试剂盒    

GS-E20388     小鼠葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒     Mouse Glucose-dependent insulin-releasing polypeptide,GIP ELISA试剂盒    

GS-E20389     小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒     Mouse Glycogen phosphorylase II,GP-II ELISA试剂盒    

GS-E20390     小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒     Mouse Glycogen phosphorylase MM,GP-MM ELISA试剂盒    

GS-E20391     小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒     Mouse Glycogen phosphorylase BB,GP-BB ELISA试剂盒    

GS-E20392     小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒     Mouse Thyroxine antibody,TAb ELISA试剂盒    

GS-E20393     小鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒     Mouse thyroid stimulating hormone receptor antidoby,TRAb ELISA试剂盒    

GS-E20394     小鼠儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒     Mouse catecholamine,CA ELISA试剂盒    

GS-E20395     小鼠白介素27(IL-27)ELISA试剂盒     Mouse Interleukin 27,IL-27 ELISA试剂盒    

GS-E20396     小鼠白介素23(IL-23)ELISA试剂盒     Mouse Interleukin 23,IL-23 ELISA试剂盒    

GS-E20397     小鼠心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒     Mouse cardiotrophln 1,CT-1 ELISA试剂盒    

GS-E20398     小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA试剂盒     Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA,α-Fodrin IgG/IgA ELISA试剂盒    

GS-E20399     小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒     Mouse lipoprotein α,Lp-α ELISA试剂盒    

GS-E20400     小鼠大内皮素(Big ET)ELISA试剂盒     Mouse Big Endothelin,Big ET ELISA试剂盒    

GS-E20401     小鼠凝血因子Ⅷ相关抗原(FⅧ-Ag)ELISA试剂盒     Mouse coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA试剂盒    

GS-E20402     小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA试剂盒     Mouse Fcoagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA试剂盒    

GS-E20403     小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA试剂盒     Mouse coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISA试剂盒