ELISA试剂盒也可用于测定抗体
根据检测目的和ELISA试剂盒操作步骤不同,有以下三种类型的常用方法:
1.间接法
此法是测定抗体最常用的方法。将已知抗原吸附于固相载体。加人待检标本(含相应抗体)与之结合。洗涤后,加人酶标抗球蛋白抗体(酶标抗抗体)和底物进行测定。
2.双抗体夹心法
此法常用于测定抗原。将已知抗体吸附于固相载体,ELISA试剂盒加人待检标本(含相应抗原)与之结合。温育后洗涤,加人酶标板中。
3.竞争法
此法可用于抗原和半抗原的定量测定。以测定抗原为例,将特异性抗体吸附于固相载体。加入待测抗原和一定量的酶标已知抗原,使二者竟争与固相抗体结合;经过洗涤分离,最后结合于固相的酶标抗原与待测抗原含量呈负相关。ELISA试剂盒过程包括:抗原吸附在固相载体上,这个过程称为包被,加待测抗体,再加相应酶标记抗体,生成抗原--待测抗体--酶标记抗体的复合物,再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体的量。
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