细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群。细胞株的特殊性质或标志必须在整个培养期间始终存在。国内资shen的细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养细胞。下面分享细胞株培养技术的三大要点:
1、取材
细胞株培养的材料主要来源于外科手术或活检瘤组织,取材时避免用坏死组织,要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位,瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养,因故不能立即培养者,可冻存。细胞株的培养方法及冻存方法同前述正常组织。
2、成纤维细胞排除
在细胞株培养中常混杂有一些成纤维细胞,培养时能与瘤细胞同时生长,并常压过癌细胞,导致癌细胞生长受阻以至消失,应仔细排除。排除方法常有:机械刮除法、反复贴壁法、消化排除法、胶原酶消化法等。
3、提高细胞培养存活率和生长率
根据实验经验,细胞株要经过对新环境的适应才能生长,因此不能局限于一般培养法,须采用一些特殊措施。如:用适宜底物,鼠尾胶原底层及饲细胞底层等。用细胞生长因子,根据细胞种类不同选用不同的促细胞生长因子,如胰岛素、氢化可的松,雌激素等。也可以考虑动物媒介培养。
总而言之,在细胞株待转化细胞数量明显上升,并出现细胞团块后,可转入细胞培养瓶中,加培养基,常温培养半个月,一般每隔一周观察一次,决定是否换液、传代,靠谱的细胞株的每个步骤都至关重要。细胞生长达一定数量后冻存,冻存前应进行核型分析和存档。
TRIzol RNA提取试剂盒操作说明
生化试剂常见问题的解决办法
动物细胞培养基的种类与优缺点
半固体培养基的配制与使用说明
靛蓝/还原靛蓝/印地科/靛青粉/靛兰(1)/还原蓝1#/靛/纯靛/铣傻謇叮合成靛青/2,2′-双氮茚型靛/Indigo
氯化硝基四氮唑蓝/氮蓝四唑/硝基蓝四氮唑/硝基BT/氯化硝基四氮唑兰/硝基氯化四氮唑蓝/氮四唑蓝/氯化四唑氮蓝/NBT
碘硝基氯化四氮唑蓝/碘硝基四唑紫/2-(对碘苯基)-3-(对硝基苯基)-5-苯基四唑氯水合物/2-(4-碘苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-苯基氯化四唑氯水合物/碘硝基四氮唑紫/碘硝基四唑/碘硝基紫四唑/碘硝基氯化四氮唑/氯化-2-(4-磺苯)-3-(4-硝基苯)-5-苯基-2H-四氮唑/2-(对碘代苯)-3-(对硝基苯)-5-苯基氯化四氮唑/INT
伊文斯蓝/伊文斯兰/伊文思兰/偶氮蓝/依文氏兰/依文思蓝/依文斯兰/埃文斯蓝/6,6'-[[3,3'-二甲基(1,1'-二苯基)-4,4'-二基]双(偶氮基)]双(4-氨基-5-羟基-1,3-萘二磺酸)四钠盐/4,4’双[7-(1-氨基-8-羟基-2,4-二磺基)萘-偶氮]-3,3’-联甲苯上钠盐/伊文思蓝/埃文蓝/偶氮兰/Evans blue
亚甲基蓝/次甲基兰/美蓝/美兰/亚甲蓝/品蓝/亚甲基兰/碱性蓝9/四甲基蓝/次甲基蓝/亚甲兰/碱性湖蓝BB/碱性亚甲天蓝/盐基湖蓝/盐基湖蓝BB/亚甲基天蓝/3,7-双(二甲氨基)吩噻嗪-5-翁氯化物/次甲基蓝三水/次甲蓝/甲稀蓝/氯化-3,7-双(二甲胺基)吩噻咛-5-
异硫氰酸玫瑰红B/异硫氰酸罗丹明B/罗丹明B异硫氰酸酯/若丹明B异硫氰酸酯/异硫氰酸若丹明B/RBITC
丽春红2R/罂粟红R/罂粟红2R/丽春红G/酸性猩红/酸性大红/二甲苯胺丽春红/丽春红C/4-[(2,4-二甲苯基)偶氮]-3-羟基-2,7-萘二磺酸二钠盐/酸性红26/苯偶氮-8-乙酰苯胺基-1-萘酚-3,6-二磺酸钠盐/酸性偶氮红/Ponceau 2R
丽春红S/猩红S/酸性红112/3-羟基-4-[2-磺酸基-4-(4-磺酸苯基偶氮)苯基偶氮]-2,7-萘二磺酸四钠盐/Ponceau S
油红O/1-[2,5-二甲基-4-(2,5-二甲基苯偶氮)苯偶氮]-2萘酚/苏丹红5B/溶剂红27/红油O/1-[[4-[(二甲基苯基)偶氮]二甲基苯基]偶氮]-2-萘酚/Oil red O
曙红Y(醇溶)/伊红Y(醇溶) /四溴荧光素/醇溶伊红/酸性红87/溶剂红43/曙红Y(自由酸)/伊红Y(自由酸)/ 2',4',5',7'-四溴-3',6'-二羟基螺[异苯丙呋喃-1(3H),9'(9H)-占吨]-3-酮/Eosin Y free acid alcohol soluble
曙红Y(水溶)/伊红Y(水溶) /水溶伊红/朝红/四溴荧光素二钠/曙红钠盐/四溴荧光黄/曙红变性次甲蓝/黄光曙红/曙红微黄/酸性红87/2',4',5',7'-四溴-3',6'-二羟基螺[异苯丙呋喃-1(3H),9'(9H)-占吨]-3-酮二钠盐/Eosin Y sodium salt water soluble
曙红B/伊红B/蓝光曙红/二溴二硝基荧光素二钠/4',5'-二溴-3',6'-二羟 基-2',7'-二硝基螺(异苯并呋喃-1(3H),9'-(9H)占吨)-3-酮二钠盐/酸性红91/Eosin B
虎红/玫瑰红/四氯四碘荧光素/孟加拉红/孟加拉玫瑰红B/酸性红94/Rose Bengal
刚果红/直接刚果红/煮大红/棉红/直接朱红/直接大红/二苯基-4,4′-二[(偶氮2)-1-氨基萘-4-磺酸钠]/直接红28/3,3'-[[1,1'-联苯]-4,4'-基双(偶氮)]双(4-氨基萘-1-磺酸)二钠/风果红/直接大红4B /Congo red
甲基红/甲红/烷红/甲烷红/对二甲氨基偶氮苯邻羧酸/酸性红2/2-[[4-(二甲基氨基)苯基]偶氮基]苯甲酸/MR
关注
拨打电话
留言咨询