在培养原代细胞时为了促进原代细胞贴壁需要对使用的T-25/T-75等耗材进行包被处理,常用的包被液有多聚赖氨酸和纤维黏连蛋白、明胶,其中ScienCell研究实验室研发的包被液就包含上述3种产品。
其中包被液多聚赖氨酸是一种合成化合物,是带正电荷的氨基酸,通过改变培养基质表面的电极来促进细胞贴壁。在细胞培养中广泛用于包被物促进细胞贴壁。除了促进细胞贴壁生长,包被液多聚赖氨酸包被后能提高原代细胞的存活率和促进神经突长出。Sciencell出售的包被液多聚赖氨酸(PLL,货号0403)是原液,分子量是70000~150000。包被液多聚赖氨酸以1-2 ug/cm2的浓度包被培养瓶。可将1mg/ml的包被液多聚赖氨酸以灭菌双蒸水稀释100倍,T-75培养瓶中加入10ml左右,37度孵箱1小时或4度冰箱过夜,用包被液包被好的培养瓶不要放置超过24小时,包被液可重复使用2-3次,注意不要污染。
包被液纤维粘连蛋白是分子量为440-500kDa的糖蛋白,存在于细胞表面蛋白和血浆中。它于细胞膜表面受体和细胞外基质成分结合。ScienCell实验室的包被液牛血浆纤维粘连蛋白(BPF,货号8248)使用亲和色谱法提纯自牛血浆,是促进细胞贴壁和延伸生长的理想基质。推荐包被浓度是2 μg/cm2。如果想达到最jia效果取决于细胞类型。
包被液明胶是来自于胶原的高分子量水溶蛋白混合物。0.2%的包被液明胶溶液用于包被培养器皿以促进细胞贴壁。推荐用于分化的人胚胎干细胞,某些原代细胞和永生化细胞。
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