使用方法:
1.胶染法(用法同EB) (1)制胶时加入GelRed核酸染料(例如:每50mL琼脂糖溶液中加入5μL GelRed 10,000×储液,以此比例类推)。 (2)按照常规方法进行电泳。 注意事项: 此方法染色染料用量相对较少,500 μL染料大约可以做100块50 mL的胶。 由于GelRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将GelRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。GelRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。 含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备,并长期保存直到使用。 此方法不适合预制聚丙烯xian胺凝胶,对于聚丙烯xian胺凝胶请使用泡染法。
2.泡染法 (1)按照常规方法进行电泳。 (2)用H2O将GelRed 10,000×储液稀释约3,300倍到0.1 M NaCl中,制成3×染色液。(例如将15μL GelRed 10,000×储液和5 mL 1 M NaCl加到45 mL H2O中)。 (3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶,室温振荡染色30 min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%丙烯xian胺的凝胶,染色时间通常介于30 min到1 h,并随丙烯xian胺含量增加而延长。
注意事项:
1)用泡染法染色时,染料用量较多,单次使用的染色液可重复使用3次左右。3×GelRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。
2)如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。
3)如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度、延长凝胶时间以保证边缘清晰、改进上样技巧或选择泡染法染色。
3.预染法(最省染料的染色方法,按25μL体积上样,500μL原液理论做20万个样品)
1)该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳
2)工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的GelRed原液稀释1000倍,即为10 X GelRed工作液。GelRed工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
3)制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。
4)样品染色:向分析样品中加入GelRed工作液和载样缓冲液,室温放置10分钟,使GelRed与样品中DNA充分结合。GelRed工作液加入量为总上样量的1/10,使GelRed在上样时的终浓度为1X.
5)DNA Marker染色:将5μL DNA Marker和1μLGelRed工作液混匀,室温放置5分钟,使GelRed与DNA充分结合。
6)上样、电泳:按常规操作。 注意事项: 根据染料分子量小,带电荷少的特性开发本染色方法,按照一块胶10个样品计算,500μL原液理论上可以完成2万块胶的染色。
植物检测试剂盒原理和使用方法
白介素ELISA试剂盒结果异常的原因
五种常用细胞组织染色方法介绍
标准物质期间核查内容与方法
相关产品
鸭子神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒
鸭子磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA试剂盒
鸭子催乳素(PRL/LTH)ELISA试剂盒
鸭子刺鼠相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒
鸭免疫球蛋白E(IgE)ELISA检测试剂盒
鸭环磷酸腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒
菠菜蔗糖磷酸合酶(SPS)ELISA试剂盒
菠菜葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA试剂盒
菠菜凝集素(PHA)ELISA试剂盒
菠菜硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒
菠菜交替氧化酶(AOX)ELISA试剂盒
吲哚乙酸氧化酶测试盒 可见分光光度法
果胶裂解酶测试盒 微量法
吲哚乙酸氧化酶测试盒 微量法
多聚半乳糖醛酸酶(PG)测试盒 可见分光光度法
关注
拨打电话
留言咨询