重组细胞因子的要求有哪些？

上海远慕生物科技有限公司

2021/06/03 10:30

　　细胞因子(cytokine，CK)是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质，具有调节固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长、APSC多能细胞以及损伤组织修复等多种功能。细胞因子可被分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子超家族、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等。

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　　下面重组细胞因子要求:

　　1. 真实性:重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析;必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。

　　2. 纯度:应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。

　　3. 生物活性:进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。

　　4. 蛋白含量:通过紫外光谱分析，SDS-PAGE电泳检测;必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液。

　　5. 内毒素:kinetic LAL法检测内毒素。

　　6. 微生物:重组蛋白在装瓶之前都经过滤除菌处理。

　　重组细胞因子的状态:

　　市场上主流的重组蛋白产品，多在不含载体蛋白或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等)的条件下，以低盐的形式做冻干处理，因此微量(多以微克计量)的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层，所以建议在收到试剂后，务必于开盖前先离心20-30秒，使可能附于管盖或管壁的蛋白成分聚集于冻干馆的底部(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。

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