生物缓冲液通常由共轭碱和弱酸或共轭酸和弱碱组成,其中我司主要生产的有Tris、Hepes、Mops等等。缓冲液是一种有助于维持稳定的pH值的溶液,一项成功的研究必然有着选择使用了正确的缓冲液。在下文,将给大家介绍选择生物缓冲液时需要考虑的五个方面。
1、pKa值
由于大多数生物反应都会在6-8的pH值之间发生,因此选择具有正确pKa值的缓冲液非常重要。在选择缓冲液之前,有必要弄清楚该实验适合的pH值水平。
如果在实验过程中pH值可能会降低或升高,则重要的是选择pKa高于或低于任何实验开始时的最佳值的缓冲液。每个缓冲液都具有一定的pH范围,在该范围内它具有足够的缓冲能力。缓冲液的pKa值应在所需pH值的一个pH范围内。
2、水溶性
缓冲液的溶解度非常重要。大多数缓冲剂必须高度溶于水。并且还需要使它们在大多数有机溶剂中的溶解度降至最低。这很重要,因为大多数生物系统都会自然使用水作为溶剂。缓冲液的水溶性越大,则制备浓缩原液就越容易。重要的是要注意稀释后,储备溶液的pH值可能会改变。
3、盐的影响
盐会严重影响实验的结果,因为大多数生物系统都容易受到盐的影响。科学描述了良好缓冲液的许多属性,包括zui小化盐效应的必要性。盐可能会产生反应,从而引起并发症并可能影响研究结果。但是,有时会在实验过程中添加盐以进行调整,以提高化合物的缓冲能力。
4、渗透
渗透是选择生物缓冲液时的关键因素。缓冲液不应穿过任何细胞膜。如果缓冲区在单元格内堆积,则实际上可以更改单元格。这有可能改变研究结果。良好的缓冲液不会在任何细胞器中积累。
5、离子强度
离子强度是一个需要认真考虑的因素。生物系统在缓冲液中具有很高的离子强度,可能会遭受严重的并发症。根据专业文献得知,离子强度是一个重要方面,因为缓冲液在实验中不会对离子浓度产生重大影响。
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