实验时经常用到PBS缓冲液,但是很多文献里面也用到了Hanks缓冲液,不知道这两种缓冲液在细胞培养方面有什么区别?也就是说它分别适合于哪些情况?
PBS :磷酸缓冲盐溶液——具有pH缓冲作用的等渗盐溶液。PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液,一般选择K2HPO4和KH2PO4配制,因为钠盐溶解的较慢。根据不同pH的溶液,称量不同质量的磷酸盐,也可以用pH计调溶液的pH。PBS一般用作支持电解质。
其配置方法如下:采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液,按以下步骤进行:
(1) 配制1/15mol/L KH2PO4,即每升水中溶解9.078克KH2PO4;
(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O,即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O;(3) 将18.2%(体积分数)KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合;最终 测定PBS液的PH值约为7.4。其作用接近于生理盐水,但是在实验室内比生理盐水的用途要广泛。
Hanks:平衡盐溶液——无机盐和葡萄糖浓度接近大部分动植物 细胞的水平,可作为动植物细胞短期培养(保存)。 Hank's配方:NaCl 8.01;KCl 0.4;CaCl2 0.14; NaHCO3 0.35;KH2PO 4 0.06;Glucose 0.34(g/l); D-Hank' s:不含钙离子、镁离子、葡萄糖。( T7 e# L7 e, K2 N
相比较而言,hanks液中盐成分较PBS复杂,且有葡萄糖,可为细胞提供简单的营养,而pbs中只有磷酸根,钠,钾,氯离子,只是蕞简单的盐平衡缓冲液,不能为细胞提供暂时的营养 。
关键要看你用这些液体来洗细胞还是存储细胞了
PBS 、hanks各都有两种,一种是含钙镁的,另一种是不含钙镁的:DPBS,DHANKS。 r) u7 n6 e3 R% P
hanks比PBS成分稍微复杂点,一般细胞培养时用DPBS就够,Dhanks一般用到原代细胞消化分离操作实验中,一般培养用PBS就够了,感觉DHANKS上场的实验比较高级点哎,对于保护细胞活力等很有好处。
HANKS对细胞略好, 不过一般洗涤等用PBS足够了。 分离时,两者皆可, 多数推荐HANKS,实际上差不多。如果分离时消化时间较长, 建议HANKS。
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