细胞划痕实验

2019/04/01   下载量: 2

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应用领域 生物产业
检测样本 其他
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参考标准 细胞划痕实验,细胞样品,

实验原理: 创伤愈合实验是一种简单、廉价的方法,也是最早发展起来的研究定向细胞在体外迁移的方法之一。该方法模拟了细胞在体内愈合过程中的迁移过程。基本步骤包括在细胞单层中创建一个“伤口”,在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像以关闭伤口,以及比较图像以确定细胞迁移速率。

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细胞划痕实验可应用于:(1)检测贴壁生长肿瘤细胞的侵袭转移能力;(2)研究细胞基质和细胞间相互作用对细胞迁移的影响。

 

实验原理:

创伤愈合实验是一种简单、廉价的方法,也是最早发展起来的研究定向细胞在体外迁移的方法之一。该方法模拟了细胞在体内愈合过程中的迁移过程。基本步骤包括在细胞单层中创建一个伤口,在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像以关闭伤口,以及比较图像以确定细胞迁移速率。

 

实验材料: 细胞样品

 

试剂,试剂盒:无血清培养基  PBS

 

仪器耗材:

6孔板

marker

直尺

枪头

 

实验步骤:

.准备:
所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)

.流程:
1.
先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2.
在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3.
第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
4.
PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
5.
放入375%CO2培养箱,培养。按061224小时取样,拍照。

下面是照片,细胞NIH3T3

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