方案摘要
方案下载应用领域 | 生物产业 |
检测样本 | 其他 |
检测项目 | |
参考标准 | 线粒体超活性染色及形态结构观察 |
实验原理 活体染色是指对生活有机体的细胞或组织某些结构能着色但又不影响细胞的生命活动和产生任何物理化学变化以致引起细胞的死亡的一种染色方法。因此活染技术通常可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。根据所用染色剂的性质和染色方法的不同,通常把活体染色分为体内活染与体外活染两类。体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内,染料的胶粒固定、堆积在细胞内某些特殊结构里,达到易于识别的目的。体外活染又称超活染色,它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小块,以染料溶液浸染,染料被选择固定在活细胞的某种结构上而显色。詹纳斯绿B 是毒性较小的碱性染料,可专一性地对线粒体进行超活染色,这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用,使染料始终保持氧化状态(即有色状态),呈蓝绿色;而线粒体周围的细胞质中,这些染料被还原为无色的色基(即无色状态)。 实验试剂 1. Ringer 溶液 氯化钠 0.85g 氯的化的钾 0.25g 氯化钙 0.03g 蒸馏水 100ml 2. 1%詹纳斯绿B 溶液(原液) 称取50mg 詹纳斯绿B 溶于5ml Ringer,稍加微热(30~40℃),使之溶解,用滤纸过滤后,即为1%原液。 3. 詹纳斯绿B 溶液(应用液) 取1%原液1ml 加入49ml Ringer 溶液, 混匀即可。现用现配。
实验原理
活体染色是指对生活有机体的细胞或组织某些结构能着色但又不影响细胞的生命活动和产生任何物理化学变化以致引起细胞的死亡的一种染色方法。因此活染技术通常可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。根据所用染色剂的性质和染色方法的不同,通常把活体染色分为体内活染与体外活染两类。体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内,染料的胶粒固定、堆积在细胞内某些特殊结构里,达到易于识别的目的。体外活染又称超活染色,它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小块,以染料溶液浸染,染料被选择固定在活细胞的某种结构上而显色。詹纳斯绿B 是毒性较小的碱性染料,可专一性地对线粒体进行超活染色,这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用,使染料始终保持氧化状态(即有色状态),呈蓝绿色;而线粒体周围的细胞质中,这些染料被还原为无色的色基(即无色状态)。
实验试剂
1. Ringer 溶液
氯化钠 0.85g
氯的化的钾 0.25g
氯化钙 0.03g
蒸馏水 100ml
2. 1%詹纳斯绿B 溶液(原液)
称取50mg 詹纳斯绿B 溶于5ml Ringer,稍加微热(30~40℃),使之溶解,用滤纸过滤后,即为1%原液。
3. 詹纳斯绿B 溶液(应用液)
取1%原液1ml 加入49ml Ringer 溶液, 混匀即可。现用现配。
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