方案摘要
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取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。
细胞免疫荧光的详细操作步骤
1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。
2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。
3,0.2%Triton X 100通透10分钟,PBS洗三遍。
4, 与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍。
5.,一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍。
6,二抗室温2小时,或者37度1半小时,PBS洗三遍。
7,最好用DAPI染核,然后直接照荧光片。
8,蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周。
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