小鼠海绵体内皮细胞

参考价:¥4050
供货周期: 现货
品牌: 抚生
规格: 25个
型号: 5×105
货号: A01X1885
有效期: 12月
标准值: T25培养瓶
上海抚生实业有限公司
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产品详情

小鼠海绵体内皮细胞

细胞简介:

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小鼠海绵体内皮细胞分离自海绵体组织;阴茎海绵体是由海绵状的小梁和腔隙构成的血窦结构,它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中,而海绵体内皮细胞则覆盖于海绵体血窦的腔面,仅占海绵体组织的2.8%。在消化海绵体组织时,胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系,破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。如果消化时间延长或胶原酶浓度过大,平滑肌细胞和成纤维细胞也将被消化下来,从而影响海绵体内皮细胞的纯度。因此,比较筛选合适的胶原酶浓度和消化时间是成功分离海绵体内皮细胞的关键。

方法简介:

公司实验室分离的小鼠海绵体内皮细胞采用混合酶消化法结合机械分离法、并用内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测:

公司实验室分离的小鼠海绵体内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

商品属性:
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产品名称

小鼠海绵体内皮细胞

组织来源

海绵体组织

产品规格

5×105cells/T25细胞培养瓶

产品货号

A01X1885

包装

瓶装

用途

仅供科研研究实验

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培养信息:

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包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%


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注意事项:

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1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时,虽然被分散成单个细胞,但它们之间的互相影响还是存在的, 而且这种影响对细胞能否存活是非常重要的。在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质, 使细胞彼此互相促进存活和生长。如果接种的细胞密度过低, 细胞之间的促生长作用很小, 虽然营养物质很充足, 也很难使细胞适应从体内的组织环境到被分散后进入独立生存环境的变化过程。 如果接种的细胞密度过大,会导致营养物质供应不足, 代谢废物积累较快需要经常换液和传代。

2)原代培养时初始培养在组织分散和分离细胞时细胞可能会受到严重的损伤。适当增大原代培养接种的细胞密度, 给培养的细胞提供更多的类似于在体内时细胞之间的相互作用, 会极大提高原代培养的细胞在体外存活率。待细胞适应体外环境后进行传代培养时再以较低的密度接种和培养。

3)由于细胞之间的相互的内在联系被打破,分离细胞在体外培养时经历的生存环境改变很大,在体外存活和生长的难度相应增加。 对于贴壁依赖性细胞来说,尽快使接种的细胞贴壁,是决定培养能否成功的关键。可以在接种后先将培养瓶置培养箱内培养 3h 到 5h,由于细胞悬液中带有少量培养液, 细胞即可以维持存活, 又可以很快接触到培养瓶底壁, 是细胞迅速黏附于底物,待细胞贴壁后,再补足培养液继续培养。

4)分离细胞培养法—悬浮型细胞培养。
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操作过程:

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1)制备细胞悬浊液,计数并用培养液调整细胞密度。

2)在培养皿中加入足够的培养液。

3)将欲接种的细胞接种到培养器皿中。

4)在培养皿内放入一个有聚四氟乙烯包被的磁棒。将培养皿封口,送入恒温箱内。在磁力搅拌器上边搅拌边培养。若接种培养瓶或试管中,封口后可将培养器皿固定在恒温摇床上,边摇动边培养,无需放置磁棒。有些细胞也可以不用磁棒或磁力搅拌器,也不必使用恒温摇床,接种于预先用硅脂包被的培养器皿内直接在培养箱中静置培养即可。

5)培养液略呈黄色换液。吸出部分旧培养液,加入新鲜培养液即可。


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