ELISA试剂盒制备方法有哪些诀窍
ELISA试剂盒免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料,如抗原抗体,酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。
ELISA试剂盒近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。制备方法包括以下步骤:
1 抗原表位的计算机筛选
2 抗原的制备
3 血清的采集
4 间接ELISA方法的建立
5 间接ELISA方法的敏感性和特异性验证
6 试剂盒的稳定性验证;
7 对屠宰场进行临床检测。
ELISA试剂盒方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好。应用本发明制得的试剂盒能有效检出感染猪的戊型肝炎病毒,适用于大批量发病样本的检测,可用于猪戊肝的快速诊断,并预防、控制猪戊肝的流行和阻断戊肝由猪向人传播。
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