UHPLC-MS同时检测奶粉和母乳中尿嘧啶核苷

2018/12/02   下载量: 2

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应用领域 食品/农产品
检测样本 乳粉
检测项目
参考标准 UHPLC-MS同时检测奶粉和母乳中十种核苷和核苷酸

Thermo Ultimate 3000系统串联TSQ Vantage MS: 泵:DGP-3600RS 自动进样器:WPS-3000RS 柱温箱:TCC-3000RS 检测器:DAD-3000RS and TSQ Vantage 色谱软件:Chromeleon 6.8 and Xcalibur

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核苷酸(Nucleotide)是核苷(Nucleoside)和磷酸(Phosphate groups)结合的化学物质,其中核苷一磷酸是有代表性的一系列品种。多个核苷酸连接成锁状的物质由其含有核苷酸的数量分为寡核苷酸(15个或少于15个核苷酸)和多核苷酸(15个核苷酸以上),后者也是构成DNA(去氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)的单位,生物的细胞中都存在。因其具有相当的重要性,对于核苷酸和核苷的研究已经成为目前生物医药,食品添加剂,母婴用品等方面的研究重点。
在一些临床研究发现,添加核苷酸的婴儿配方奶粉,可以减少腹泻的发生及促进较小胎儿的生长发育。而牛奶中一般不含有核苷酸,且目前的婴幼儿配方奶粉国家标准中未规定这项指标,但是根据核苷酸对婴幼儿的特殊功效,大部分的乳品企业都将其作为重要指标,因此建立简单方便的检测乳制品中核苷酸的方法就显得迫在眉睫。
查阅文献发现,目前对于核苷酸和核苷的测定方法主要是基于HPLC-UV或LC-MS为主,尤其是随着MS技术的普及,采用LC-MS方法检测核苷酸和核苷已经逐渐成为主流[1-10]。然而因为核苷酸与核苷本身的物理化学性质导致其在采用LC-MS检测是不可避免会产生局限性。因其强极性性质,导致其在常规的反相色谱柱上面往往不易保留,对此问题Coulier [1]等,Viñas[7]等和Yamaoka [8]等采取添加离子对试剂或者Inoue等[3]采用HILIC的并且选择高浓度的(30 mM甲酸铵)缓冲盐。因此文献中报道的方法普遍存在的检测限过高问题,例如Ren [6]等采用LC-MS同时检测5种核苷酸检测限都在0.01 μg/ml以上,Inoue[3]等采用HILIC-MS 同时检测5中核苷酸检测限为0.005 μg/ml以上。

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