01、样品制备和上样的问题
问题1:裂解液或样品缓冲液中的还原剂过多导致泳道边缘有阴影。
问题2:盐离子过高、RIPA浓度过高、变性剂浓度过高会导致泳道宽度不一致,泳道变宽。
问题3:样品过粘,样品泳道边缘有纵向条纹,哑铃型条带,泳道变宽。
问题4:蛋白质聚集导致形状诡异的狭窄泳道。
问题5:泳道的蛋白上样量过高。
02、电泳问题
问题1:由于配制胶的组分不合理或者温度、阳光、杂质等外界因素的影响导致丙烯酰胺聚合不完全。
问题2:电泳时温度影响蛋白条带的形状。
问题3:凝胶百分比选择不恰当,导致浓缩胶效果不好、目标条带跑出胶外、或目标条带分离不彻底。
问题4:电泳装置不完善,内槽漏液导致条带倾斜。
03、转印问题
问题1:膜上残留气泡导致的条带问题。
问题2:转印过度(转印膜上条带量非常少,条带出现在滤纸上)。
问题3:转印不足(转印前后的凝胶的总蛋白对比,差异不大)
问题4:转印不均匀。
04、背景问题
问题1:背景过强。
问题2:背景有污迹。
问题3:背景有斑点。
05、非特异条带问题
问题1:膜曝光时出现目的条带以外的信号。
06、弱检测信号问题
问题1:膜曝光时难以看到条带信号。
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