多肽和蛋白等生物大分子,尺寸通常远大于固定相表面官能团,其表面局部区域与固定相发生作用,分离以吸附机理为主:
初始条件下,流动相中有机成分浓度较低,多肽和蛋白等生物大分子与固定相疏水作用较强,几乎被固定相完全吸附;当流动相中有机成分到达特定浓度,大分子完全从固定相上洗脱下来,不再与固定相发生作用。因此,流动相有机成分极微小变化,就可以明显影响多肽和蛋白的反相保留行为。
抗体/蛋白类药物完整和还原态分析,是表征其疗效与稳定性的关键质量属性之一,目前通常使用反相色谱分离模式;抗体偶联药物(ADC)DAR值分析,基于不同载荷疏水性差异,同样可以使用反相色谱来进行分离。
△BioCore RP-1000
BioCore RP-1000是一款以先进的单分散聚合物微球为基质,经优化的装柱工艺而成的色谱柱,适用于反相分离模式下,完整蛋白分子量测定、抗体片段和抗体偶联药物DAR值分析等。
特性
单分散聚合物微球,柱效高;
分离选择好,非特异性吸附低;
柱流失低,质谱兼容性良好;
良好柱间一致性。
参数
BioCore RP-1000 | |
功能基团 | 苯基 |
基质 | 单分散PS/DVB微球 |
粒径 | 5 µm |
孔径 | 1000 Å |
常用柱规格 | |
耐压上限 | 4500 psi |
耐温上限 | 100 °C |
pH范围 | 2 - 12 |
应用领域 | 抗体/蛋白分子量鉴定/片段分离 |
应用案例
1、IgG1片段分离-三氟乙酸体系
2、IgG1片段分离-甲酸体系
3、抗体偶联药物
小结
使用BioCore RP-1000液相色谱柱,可以实现IgG抗体片段和抗体偶联药物不同DAR值组分的良好分离。
BioCore RP-1000色谱柱订购信息
常规规格货号 | |
产品描述 | 货号 |
BioCore RP-1000 5μm, 2.1×100mm | B811-050100-02110S |
BioCore RP-1000 5μm, 2.1×50mm | B811-050100-02105S |
BioCore RP-1000 5μm, 3.0×100mm | B811-050100-03010S |
BioCore RP-1000 5μm, 3.0×50mm | B811-050100-03005S |
BioCore RP-1000 5μm, 4.6×100mm | B811-050100-04610S |
BioCore RP-1000 5μm, 4.6×50mm | B811-050100-04605S |
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