志贺氏菌的血清学鉴定方法!
挑取5%羊血琼脂平板上的菌落,进行志贺氏菌的血清学鉴定,设盐水对照。
一、表面抗原(K抗原)
在新分离的某些菌株菌体表面含有此种抗原。不耐热,加热100℃1小时即被破坏。具有此种抗原的菌株,可阻止菌体抗原与相应免疫血清发生凝集。
二、菌体(0)抗原
1、型特异性抗原:化学组成为多糖,是光滑型菌株所含有的重要抗原。当菌株变为粗糙型时,此抗原也常随之消失,根据所含的型抗原不同,可将志贺菌属分为A、B、C、D四个群及39个抗原型。
2、群特异性抗原:为光滑型菌株的次要抗原,也是菌体抗原的一种。特异性较低,主要存在于B群。根据所含的群抗原不同,可将一些菌型分为多种亚型。
人们原来的认识认为血清学试验是特异性的,但是志贺氏菌的 O抗原和大肠埃希氏菌属关系密切,有半数的菌型与大肠埃希氏菌的某些O抗原完全相同。相同抗原菌属间存在血清交叉凝集反应。因此,生化试验对于属的鉴定是非常重要的。
三、抗原的准备
志贺氏菌属没有动力,所以没有鞭毛抗原。
抗原构造与分型:志贺氏菌属细菌的抗原结构由菌体抗原(O)及表面抗原(K)组成。
O抗原为糖脂蛋白复合物,可分为型特异性抗原和群特异性抗原。志贺氏菌分为4个群,48个血清型(包括亚型及变种)。K抗原在志贺菌属分类上无意义。
先用四种志贺氏菌多价血清检查,如果呈现凝集,则再用相应各群多价血清分别试验。先用B群福氏志贺氏菌多价血清进行实验,如呈现凝集,再用其群和型因子血清分别检查,福氏志贺氏菌各型和亚型的型抗原和群抗原鉴别见表4。如果B群多价血清不凝集,则用D群宋内氏志贺氏菌血清进行实验,如呈现凝集,则用其Ⅰ相和Ⅱ相血清检查;如果B、D群多价血清都不凝集,则用A群痢疾志贺氏菌多价血清及1~12各型因子血清检查,如果上述三种多价血清都不凝集,可用C群鲍氏志贺氏菌多价检查,并进一步用1~18
四、各型因子血清检查
刮取5%羊血琼脂平板上的单个菌落,进行系统生化鉴定。
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