大肠杆菌生化培养基的配方及原理!
1、MR-VP培养基Methyl Red Voges Proskauer Broth
①用途:
用于大肠杆菌的甲基红和V-P试验(SN标准)。
②配方:(g/L)
③原理:
甲基红(MR)试验:肠杆菌科的细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖,产生丙酮酸,丙酮酸再被分解,生成甲酸、乙酸、乳酸、琥珀酸。大肠杆菌分解丙酮 酸,次生的酸类较多,pH为4.5或更低,甲基红呈现红色(阳性)。在产气杆菌的培养液中一部分丙酮酸变为中性的乙酰甲基甲醇,生成的酸类较少,pH在5.4以上,甲基红呈现桔黄色(阴性)。
乙酰甲基甲醇生成试验(V—P试验):细菌发酵葡萄糖生成丙酮酸,某些细菌可使丙酮酸脱羧形成乙酰甲基甲醇。在碱性溶液中,乙酰甲基甲醇可在空气中氧化成二乙酰(丁二酮)。二乙酰再与蛋白胨中精氨酸的胍基作用,生成红色化合物。试验中加入α—萘酚是作催化剂,使反应的颜色加深,提高反应的敏感性。
④用法:
称取本品 1.7g,加热溶解于100ml 蒸馏水中,分装试管, 121℃高压灭菌 15 分钟备用。
2、色氨酸肉汤
①用途:
用于沙门氏菌和志贺氏菌的生化检测
②配方:(g/L)
③原理:
细菌产生色氨酸酶,可分解蛋白胨中的色氨酸,生成靛基质(吲哚),靛基质与试剂对二甲基苯甲醛作用,生成玫瑰色靛基质。
3、结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)Violet Red Bile Agar
①用途:
用于大肠菌群的固体平板检测(GB2008、SN标准)
②配方:(g/L)
③原理:
结晶紫是一种医药名称,俗称:紫药水,有较好的杀菌作用,且无刺激性及毒性。大肠埃希氏菌产酸,菌落吸收中性红呈紫红色,周围琼脂培养基中中性红遇酸变红,胆盐遇酸产生沉淀。
4、Korser氏枸椽酸盐肉汤Korser Citrate Sodium Broth
①用途:
用于细菌枸椽酸盐试验(SN标准)
②配方:(g/L)
③原理:
某些细菌能利用培养基中的枸橼酸盐作为weiyi的碳源,也能利用其中的铵盐作为weiyi的氮源,细菌生长过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐和分解铵盐生成的氨,使培养基变碱,使指示剂呈碱性反应。
④用法:
称取本品 4.7克,溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,每管10 mL,121℃高压灭菌15分钟,备用。
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