小鼠结肠上皮细胞的作用与相关研究!
一、背景
上皮细胞覆盖于身体表面并衬贴于体内空腔器官腔面的细胞。其排列有明显极性,一面朝向身体表面或腔面,称游离面;一面向着深部的结缔组织,称基底面。上皮细胞具有强大的角生和更新能力。上皮组织具有保护、吸收、分泌和排泄等作用。当上皮细胞受损时,则影响机体的防御功能。
二、作用
小鼠结肠上皮细胞是机体内外环境的重要屏障,持续暴露于大量抗原中,也是机体面对病原微生物的第一道防线。因此,小鼠结肠上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外,在粘膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。小鼠结肠上皮细胞作为首先接触抗原的细胞,在粘膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用,它决定粘膜免疫反应的发生、性质和强度。
三、相关研究
有研究探讨跨膜结合蛋白occludin在血吸虫病肝硬化小鼠结肠上皮细胞中的表达变化及其意义。将40只健康小鼠随机分成对照组(N组)和模型组(M组)各20只,M组采用腹部敷贴法制作血吸虫病模型;造模后120d处死动物,用鲎试验法测定门静脉血内毒素水平;免疫组化和半定量Western印迹方法测定结肠上皮紧密连接蛋白occludin的表达;透射电镜观察结肠上皮细胞的超微结构。
结果:M组门静脉血内毒素水平高于N组(P<0.01);M组结肠上皮occludin蛋白的表达水平低于N组(P<0.01);两者之间呈显著正相关。因此血吸虫病肝硬化可发生肠源性内毒素易位、内毒素血症,可能与紧密连接蛋白occludin表达下降和紧密连接蛋白结构异常有关。
还有实验考察雷公藤多苷对结肠炎小鼠结肠Fas/FasL表达及细胞周期的干预作用。方法是三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇法复制溃疡性结肠炎动物模型,雷公藤多苷灌肠或灌胃给药10d后,采用流式细胞术观察结肠上皮细胞周期及Fas/FasL表达。
结果:灌胃组小鼠结肠上皮细胞处于G0/G1期细胞数量明显下降,S期细胞数量明显增加(P<0.05或P<0.01),作用趋势上优于灌肠组。同时,两组小鼠结肠粘膜上皮表达Fas水平明显下降(P<0.05或P<0.01),而FasL水平显著性升高(P<0.05)。雷公藤多苷可能通过干预结肠上皮细胞Fas/FasL表达及细胞周期而治疗实验性结肠炎。
另外,有实验观察了大黄多糖对溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠上皮细胞和外周血中性粒细胞(PMN)凋亡的影响,进一步阐明大黄多糖治疗的机制。方法:用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠复制小鼠UC模型,动物分为对照组、模型组、大黄多糖(400mg/kg)治疗组.TUNEL法检测结肠上皮细胞凋亡,免疫组织化学方法观察Caspase3表达情况,Western-blot法检测Fas、FasL蛋白表达,流式细胞仪测定PMN凋亡率变化。
结果:模型组动物结肠上皮细胞凋亡均显著高于对照组,而PMN凋亡率则显著低于对照组(40.5±7.8%vs57.7±8.2%,P<0.01);大黄多糖治疗组结肠上皮细胞凋亡低于模型组,PMN凋亡率(46.3±6.5%)则明显高于模型组(P<0.01).与对照组相比,模型组小鼠结肠上皮Caspase3、Fas、FasL蛋白表达量明显增加;大黄多糖治疗后,Caspase3、Fas、FasL蛋白表达量显著减少,低于模型组。
结论:大黄多糖通过降低Caspase3表达,从而抑制Fas/FasL途径引起的结肠上皮细胞的凋亡,同时增加PMN凋亡率,减少PMN向结肠的募集,从而减轻肠道局部免疫反应,起到治疗溃疡性结肠炎的作用。
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