短双歧杆菌的作用与应用及注意事项!
短双歧杆菌Bifidobacterium是1899年由法国学者Tissier从母乳营养儿的粪便中分离出的一种厌氧的革兰氏阳性杆菌,末端常常分叉,故名双歧杆菌。双歧杆菌(Bifidobacterium)是天然存在于结肠中的优势菌群,是最早定植于人体肠道的一类微生物,在调节肠道菌群平衡和促进肠道正常发育等方面具有重要作用。双歧杆菌是现在正被逐渐开发利用的一种肠道有益菌,是具有各种形态的杆菌。双歧杆菌属有2Chemicalbook8种,其中常见和常用的菌种有:婴儿双歧杆菌、两歧双歧杆菌、长双歧杆菌、青春双歧杆菌和短双歧杆菌。短双歧杆菌经革氏染色呈阳性,而耐酸,不形成芽袍,无运动性,美蓝染色菌体着色不规则,厌氧,最适生长pH值为6.5-7.0,最适生长温度为37℃-41℃。
一、菌种简介
平台编号:Bio-67125
提供形式:冻干物
拉丁属名:Bifidobacterium Breve
中文名称:短双歧杆菌
属名:Bifidobacterium
种名加词:breve
其它中心编号:=AS 1.2213=ATCC 15700
来源历史:←中科院微生物研究所
收藏时间:2006.7.5
资源归类编码:15131527101
模式菌株:模式菌株
主要用途:分类;研究
具体用途:分类学研究。
生物危害程度:四类
致病对象:无
培养基:酪蛋白胨 10.0g,牛肉膏 10.0g,酵母粉 5.0g,葡萄糖 5.0g,乙酸钠 5.0g,柠檬酸二铵 2.0g,Tween 80 1.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4.7H2O 0.2g,MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH6.8。
培养温度:37℃
培养时间:48 小时
资源保藏类型:培养物
保存方法:真空冷冻干燥法
实物状态:有实物
共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享
用途:分类学研究,《GB 4789.34-2/12双歧杆菌的鉴定》阳性对照菌株。
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
二、培养基
双歧杆菌培养基
大豆蛋白胨 5.0 克 胰胨 5.0 克 酵母提取物 10.0 克 葡萄糖 10.0 克
盐溶液 40.0ml L-半胱氨酸 0.5 克 0.1%刃天青 1.0ml 琼脂 15.0 克
蒸馏水 1.0 升 pH7.0
其中盐溶液的配制:
氯化钙 0.2 克 七水硫酸镁 0.48 克 磷酸氢二钾 1.0 克 磷酸二氢钾 1.0 克
碳酸氢钠 10.0 克 氯化钠 2.0 克 蒸馏水 1.0 克 pH 6.5
三、短双歧杆菌的作用
双歧杆菌具有免疫刺激作用,可以通过刺激全身免疫器官的发育,使其发挥免疫监视功能双歧杆菌还可以促进各种细胞因子和抗体的产生,提高巨噬细胞和自然杀伤细胞的功能活性,从而达到杀死肿瘤细胞和抑制肿瘤生长的作用。
四、短双歧杆菌的应用
当前世界各国都开始把双歧杆菌应用于食品中,在日本双歧杆菌已被用于发酵乳、乳酸菌饮料、牛乳、乳饮料、乳粉、糕点和保健食品中,而美国Chemicalbook、西欧、加拿大、瑞士把此菌应用于酸奶、干酪、液体乳、发酵奶油中。在我国双歧杆菌常被应用于乳制品中,如在牛乳、奶粉中加此菌,最常见的为乳酸菌饮料。我国学者在应用双歧杆菌方面也已有了新的研究与开发,如用双歧杆菌发酵黑米酸乳,这是植物性食品、动物食品和微生物食品三者有机结合的产物,具有重要的食用价值;在豆奶粉中加入双歧杆菌,能更增加其营养价值。
五、保藏条件
斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存,活化好的菌种要放厌氧环境下保存。
六、注意事项
1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用无菌吸管吸取 0.3ml 适宜的培养液(即以上建议的培养基配方,不加琼脂)或者无菌水,滴入冻干管中,轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液,接种在培养基上(建议不超过 2 支平板,若需液体培养,制作液体培养液时,应使用厌氧螺口试管,并利用高纯氮气除去试管和培养中的氧气);
2)经过冷冻干燥保藏,菌种处于休眠状态,复苏培养时可能会延迟生长,这时需较长的培养时间; 若您收到的是已复苏的培养物(非冻干菌),则可以直接用于您的实验,或根据需要转接培养如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
3)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
4)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
5)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;
6)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系。
7)如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到菌钟后 2 个月内联系,逾期不予受理;
8) 打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。
9)安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。
10)西林瓶开封:用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部,在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖, 注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞,用 75%酒精棉消毒瓶口部分,使用无菌吸管注入 0.2ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。
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